实验二 淀粉质原料中粗淀粉的测定

1、发酵分析酵分析实验实验指导西南科技大学生命科学与工程学院第1页实验二实验二淀粉质原料中粗淀粉的测定淀粉质原料中粗淀粉的测定一、实验目的一、实验目的1、掌握廉爱农（LaneEynon）法测定还原糖的原理和方法；2、熟悉容量滴定过程。二、实验原理二、实验原理葡萄糖(或还原糖)能还原铜盐类(以酒石酸钾钠铜为最显著)为Cu2O红色沉淀。主要反应如下：1、淀粉经水解成葡萄糖，葡萄糖中的醛基易被氧化，可用费林试剂测定葡萄糖的含量。(C6H10O5)

2、nnH2O酸或酶nC6H12O62、费林(Fehling)试剂是一种氧化剂，由甲液和乙液组成，甲液为硫酸铜(CuSO4)溶液，乙液为氢氧化钠(NaOH)和酒石酸钾钠(NaKC4H4O6)溶液，平时甲液、乙液分别贮存，使用时等体积混合。混合后，CuSO4和NaOH反应，生成蓝色的氢氧化铜(Cu(OH)2)沉淀。CuSO42NaOHCu(OH)2(蓝色)Na2SO4生成的Cu(OH)2沉淀与酒石酸钾钠反应，生成天蓝色的酒石酸钾钠铜配合物，使

3、Cu(OH)2溶解。NaKC4H4O6Cu(OH)2NaKCuC4H2O6(天蓝色)2H2O3、NaKCuC4H2O6配合物中的Cu2具有氧化性，当与还原糖共热时，能使还原糖中的羰基氧化，而Cu2被还原生成一价的Cu2O(红色)沉淀。2NaKCuC4H2O6C6H12O62H2O2NaKC4H4O6C6H12O7Cu2O(红色)4、反应终点用次甲基蓝(蓝色)指示剂显示。因次甲基蓝氧化能力较Cu2弱，故待Cu2全部还原后，过量一滴还原糖立

4、即使次甲基蓝还原成次甲基蓝隐色体(无色)，溶液蓝色消失以示终点。C6H12O6次甲基蓝（蓝色）H2OC6H12O7次甲基蓝隐色体（无色）HCl三、实验材料与试剂三、实验材料与试剂1、样品玉米粉2、器材电子天平；电热恒温水浴锅；回流装置；酸碱滴定装置；调温电热套；pH试纸；三角瓶。3、试剂CuSO45H2O，酒石酸钾钠，NaOH，HCl溶液；次甲基蓝；葡萄糖。发酵分析酵分析实验实验指导西南科技大学生命科学与工程学院第3页6、计算：1)费林

5、试剂校正值先求得10ml费林试剂相当的葡萄糖质量F（g）:F=cV式中：c标准葡萄糖浓度，gml；V消耗标准葡萄糖溶液的总体积，ml；再从附表1中查得Vml时相当的葡萄糖质量F0(g)，费林试剂校正值f为：f=FF0=cVF02)水解液中所含葡萄糖量从附表1中查得10mL费林试剂消耗的水解糖液体积V2相当于100mL水解糖液中所含葡萄糖量G(mg)，则1ml水解液中所含葡萄糖量为G100，再乘以费林试剂校正值，即为1ml水解液中实际含葡

6、萄糖量(g)。1ml水解液中实际含葡萄糖量=G10011000f3)粗淀粉含量粗淀粉=G10011000f5001W0.9100%式中：W样品质量，g；500样品稀释体积，ml；0.9葡萄糖与淀粉的换算系数。五、注意事项五、注意事项1、谷物、薯类等淀粉质原料宜用盐酸水解法；而含多缩戊糖、半纤维素较高的壳皮原料，如麸皮、稻壳、谷糠、高粱等宜用酶法水解。2、滴定必须在沸腾条件下进行，因为这样可加快还原糖与Cu2的反应速度，同时防止空气进入。

7、沸腾后继续滴定至终点的毫升数应控制在0.51mL内，否则应重新滴定。3、试样经酸水解后应立即冷却，并用碱中和，因在强酸性或强碱性溶液中，会有部分糖被分解。4、样品液中的还原糖浓度不宜过高或过低，根据预备试验结果，应将样品液稀释至还原糖的含量在1左右为宜。5、滴定至终点蓝色褪去后，就不应再滴定，因次甲基蓝指示剂被还原褪色后，当接触空气时，又会被氧化重现蓝色。6、次甲基蓝也是一种氧化还原性物质，过早加入与过量加入均会造成滴定误差。7、滴定速