单股负链rna病毒

1、第二十四章单股负链RNA病毒1包括副粘病毒科，弹状病毒科，丝状病毒科，波纳病毒科2特点：核衣壳螺旋对称，含RNA聚合酶，出芽方式成熟，有囊膜及囊膜粒，单股负链RNA，不分节段，胞浆内复制。第一节副黏病毒科一、分类呼吸道病毒属（以前叫副粘病毒属）副黏病毒亚科腮腺炎病毒属麻诊病毒属肺病毒亚科肺病毒属火鸡肺病毒属二、主要特征病毒颗粒多形性，可呈丝状，有囊膜及纤突，核衣壳螺旋对称，单分子单股负链RNA，含6~10个基因，编码10~12个蛋白质，

2、多数为结构蛋白。纤突具有2种糖蛋白：血凝素神经氨酸酶（HN）及融合蛋白（F）。一、呼吸道病毒属（一）人副流感病毒1型（二）牛副流感病毒3型：又称运输热病毒，是牛及绵羊在运输及其它应激环境时发生的呼吸道综合症，如肺炎等。（三）鼠副流感病毒1型：又叫仙合病毒，1952年日本仙台婴儿发生肺炎并分离到该病毒。感染鼠后被毛粗乱，弓脊，呼吸困难，发育不良，消瘦，妊娠期延长，新生鼠死亡。二、麻诊病毒属属特征：核衣壳螺旋状对称，有囊膜，囊膜上纤突只含血

3、凝素，无神经氨酸酶，单股负链RNA，能凝哺乳动物红C，该属病毒间抗原有效反应。（一）麻诊病毒：引起人和猴的麻疹病。（二）犬瘟热病毒：（CDV）1犬瘟热病毒与麻诊病毒、牛瘟病毒有相同抗原成份。2致病性：急性型出现双相发热（体温两次开高），眼鼻有卡他性或脓性分泌物。在第二次发热时表现呕吐，腹泻，呼吸道卡他炎症，有时发展为肺炎。有的神经抑郁，体重下降，脱水，脚垫和鼻过度角质化，肌肉痉挛或后肢瘫痪。3诊断：①病毒分离鉴定：病料处理后接种犬肾或貂

4、肾原代细胞培养，经鸡胚绒毛尿囊膜适应的毒可在MDCK，Vero细胞上生长产生CPE，特点为出现放射状细胞及形成合胞体。然后用荧光抗体或琼脂扩散检测。②血清学试验：中和试验，补体结合试验，免疫荧光试验，琼扩试验。三、腮腺炎病毒属（一）新城疫病毒（NewcastlediseasevirusNDV）又称禽副粘病毒1型，1926年在英国新城发现。1致病性：引起鸡的新城疫，急性败血症，慢性神经症状，鸭鹅大多为隐性感染，鸽、鹦鹉感染发病。人感染发生

5、一过性结膜炎。2病毒特征：核衣壳螺旋状对称，有囊膜，单股负链RNA不分节段。囊膜上有血细胞凝集素H和神经氨酸酶N。由于有血凝素，故病毒能凝集多种动物红C，叫HA（血凝试验），这种凝集性能为特异性血清所抑制叫HI（血凝抑制）试验。3抵抗力（略）4培养：①9~11日龄鸡胚尿囊膜或尿囊腔中生长好，鸡胚2472h死亡胚体出血，脑炎。②细胞培养，鸡胚肾原代或传代C中增殖出现CPE，表现为多核合胞体形成。5抗原性（本科不讲）NDV只有1个血清型，但

6、毒株的毒力有较大差异，主要取决于其HN及F的裂解及活化。无毒株的HN和F为无活性的前体，有毒株的这些前体可被裂解切割并活化。据毒力的差异可将NDV分成3个类型：①强毒型；②中毒型；③弱毒型。根据以下致病指数即：病毒对一日龄雏鸡脑内接种的致病指数（ICPI）；42日龄鸡静脉接种的致病指数（IVPI）；最小致死量致死鸡胚的平均死亡时间（MDT）。强毒：MDT在40~70h之间ICPI＞2.0IVPI＞2.0中毒：MDT在44~70hICPI

7、=0.6~1.8弱毒：MDT＞68hICPI≤0.25IVP作为参考6微生物诊断①病毒分离培养：病料（脑，脾，肺，血）→称重剪碎用灭菌生理盐水作1:5~1:10稀释→研磨→（37℃~20℃）冻融3次→2000~3000rPM离心15min取上清→加双抗4℃过夜→接种鸡胚尿囊腔或细胞0.22μM滤膜过滤→收获尿囊液或细胞培养液，进行下列试验。①HA试验：检验是否含有病毒。HI试验（血凝抑制试验）：不能抑制则不是NDV，若能抑制则为NDV。

8、②荧光抗体：检查病料中病毒；③ELISA；④中和试验⑤电镜；⑥HI抗体的水平是衡量免疫力的指标7免疫治疗①弱毒疫苗：自然弱毒株如：F株（Ⅲ系）；B1株（Ⅱ系苗）；Lasota株（Ⅳ系苗）Ⅴ4株。毒力弱适于1—2周龄雏鸡免疫。②中等毒力疫苗：I系苗，Roakin株，Komov株，Herts33株。这些是强毒通过鸡胚致弱而成，适于2个月以上鸡的加强免疫。先用弱毒苗免疫，再用中等毒力疫苗免疫。第二节弹状病毒科包括4个属：狂犬病毒属，水泡病毒属

9、，暂时热病毒属，水生动物弹状病毒属。一、狂犬病毒属狂犬病病毒（RABV）（一）致病性：引起人和各种动物的狂犬病。潜伏期15~25天，有的达1年。病毒通过伤口感染，在伤口附近肌肉细胞内复制，而后从外周N向中枢N传播，在中枢N中大量复制，引起脑组织受损出现N症状，病毒从脑沿传出N至唾液腺，在其中复制产生大量病毒分泌到唾液中。（二）病毒特征：病毒子呈子弹状，有囊膜，但底部缺少囊膜，核衣壳螺旋对称，单股负链RNA。有5种主要病毒蛋白：①G蛋白：

10、为囊膜表面的突起的糖蛋白，能凝集鹅和雏鸡红C②N蛋白：为核衣壳主要蛋白，诱导机体产生非中和抗体，主要诱导机体产生细胞免疫③NS蛋白：（磷酸蛋白）与N蛋白和L蛋白一起负责病毒RNA转录和复制④M蛋白：基质蛋白，与维持病毒结构和形态有关⑤L蛋白：RNA聚合酶（三）抗原性：从自然病例分离的病毒叫“街毒”，对动物感染力强，不同地域分离的病毒其抗原上十分接近。街毒连续通过兔脑或脊髓内传代，对家兔潜伏期缩短，固定化，神经组织亲和性增强，此时称“固定

11、毒”。固定毒对原宿主（狗）的毒力下降，用来制作狂犬病疫苗。（四）防治1巴氏德研制“固定毒”制成干燥减毒疫苗。在人被狂犬咬后接种增殖比野毒快的疫苗，在野毒侵入中枢N之前，使机体产生抗体。最好同时注射高免球蛋白。2细胞灭活苗3基因工程苗狂犬病感染后动物无一耐过，均告死亡。（五）检查：将海马角等部位脑组织作触片，用包涵体染色法染色可见嗜酸性红色的包涵体。第二十五章分节段的负链RNA病毒包括正粘病毒科，布尼病毒科，砂粒病毒科，都为分节段的单股负

12、链RNA病毒。第一节正粘病毒科1分类：分4个属甲型流感病毒属：引起马，猪，貂，海豹，鲸，禽及人的感染乙型流感病毒属：仅感染人丙型流感病毒属：感染人与猪，但极少引起严重疾病托高土病毒属：以蜱为媒介的虫媒病毒，感染人及家畜。囊膜上的糖蛋白纤突包括棒状血凝素H及蘑菇状的神经氨酸酶N是两个最为重要的分类指标，由于发生抗原性漂移或转移，甲型流感病毒可分为15个H型及9个N型，又可根据病毒的宿主地理来源毒株号分离年代，进一步分类命名。如：甲型流感病

13、毒马布拉格156（H7N7）马流感病毒1型甲型流感病毒人香港168（H3N2）人流感1968年大流行株。H1~15N1~9存在多种组合，但以下几种组合导致出现重要病原：①H7N7H3N8引起马流感；②H1N1H3N2常从猪上分离③H7N7H4N5从流感海豹上分离；④H10N4貂上分离⑤H1N1H2N2H3N3H5N1引起人流感；⑥几乎所有H1~15N1~9组合都在禽类中发现，特别是H5N2H7N1引起禽流感。2主要特性：病毒子多形性，有

14、球形，新分离的为丝状，有囊膜和纤突，核衣壳螺旋对称，线状单股负链RNA，甲型、乙型基因组分8个节段，丙型7个节段，托高土病毒6个节段，囊膜上有2种糖蛋白纤突，即H和N，有血凝性，细胞核内复制。有10个蛋白（PB2、PB1、PA、NP、HA、NA、M1、M2、NS1、NS2）。3抗原性：主要抗原成分有：NP、M1、HA、NANP、M1具有型特异性，相应抗体对病毒感染无保护力；HA、NA是种特异性抗原，HA使动物产生中和抗体，有保护作用，N

15、A抗体不能中和病毒但可减少病毒增殖改变病理程度。HA和NA变异频率很高，有H1~15N1~9，各亚型之间无血清交叉反应。一、禽流感病毒（AIV）（一）致病性：引起鸡，火鸡，鸭的流感，也叫真性鸡瘟。（二）病毒特征：（见科特征）（三）培养：1在9~11日龄鸡胚尿囊膜或尿囊腔中生长，使鸡胚死亡2鸡胚细胞，鸡胚成纤维C中生长产生CPE（四）诊断：1病毒分离：新鲜病料（分泌物，脾，肝，肾）常规处理接种尿囊腔或鸡胚细胞，收获尿囊液或细胞培养液作HA

16、HI试验。2血清学试验：ELISA，中和试验，荧光抗体，补体结合第二十六章套式病毒目这类病毒均采用套式系列的转录方式，也就是基因表达通过一系列3′端相同的亚基因组mRNA完成。本目包括：冠状病毒科，动脉炎病毒科。第一节冠状病毒科1分类：由于病毒外膜有突起似日冕状或王冠状，故名冠状病毒，本科有2个属冠状病毒属：代表种为传染性支气管炎病毒凸隆病毒属2主要特征：病毒子呈球状，有囊膜及棒状纤突，核衣壳螺旋对称，单分子正股RNA，为已知RNA病毒

17、中基因组最大的，纤突规则排列为冠状，外膜由双层脂蛋白组成。有3或4种主要蛋白：核衣壳蛋白N及若干囊膜纤突糖蛋白（包括主要纤突糖蛋白S，主要嵌膜蛋白M，次要嵌膜蛋白E）。C浆内复制。一、鸡传染性支气管炎病毒IBV（一）致病性：引起鸡的急性高度接触性呼吸道疾病，特征为咳嗽，喷嚏，气管啰音。有的毒株可使病鸡产生肾脏及肠道病变，肾肿大，尿酸盐沉积。冠状病毒颗粒为不规则形状的，直径约为60220nm具有一层外包膜，上附有特色的棒型包膜子粒(大约2

18、0nm长x10nm宽末端).它的花冠(Latincona)样外观赋予它的族名。颗粒的中央显示EM制备不规则阴性染色，核蛋白壳呈现松散缠绕相当无序的状态。（二）主要特征：病毒呈球形，有囊膜，囊膜表面有棒状纤突。单分子单股正链RNA有感染性，胞浆内复制，以出芽方式获得囊膜，形成胞浆内包涵体。IBV有3种主要结构蛋白：①S蛋白，构成病毒纤突，位于病毒最外层，它刺激机体产生中和抗体，决定病毒组织嗜性，并在病毒与细胞吸附过程中起重要作用。S蛋白中

19、抗原决定簇某些氨基酸变化，可能产生一个新的突变种。②M蛋白与病毒复制有关。③N蛋白，包裹核酸，使之容易装于病毒壳内，并参与RNA复制。病毒经1%胰酶在56℃水浴中处理30min后，能凝集鸡红C，而尿囊液中未经处理的IBV不凝集鸡红C。二、牛冠状病毒BCV本病毒是新生犊牛腹泻的重要病原之一，还可引起牛的呼吸道感染和成年牛的冬季血痢。三、犬冠状病毒CCV引起犬发生胃肠炎，以频繁呕吐，腹泻为主，临床症状消失后14~21天复发为特征。第二节动脉

20、炎病毒科1分类：本科仅一个属即动脉类病毒属，过去归于被膜病毒科，代表种为马动脉炎病毒，其他还有猪呼吸与繁殖综合征病毒，猴出血病毒。2主要特征：核衣壳立方体对称(可能为20面体)，有囊膜，囊膜表面有纤突，单分子线状正股单股RNA，具有5′端帽子结构及3′端尾巴。病毒蛋白有：核衣壳蛋白N，非糖基化的嵌膜蛋白M，2种糖蛋白膜粒GS及GL。（三）病毒分离1病料处理：从肺，肾，输卵管，扁桃体采样常规处理；活鸡可从气管和池殖腔棉拭子擦取，无菌处理后

21、接种鸡胚或细胞。2鸡胚接种：910日龄鸡胚尿囊腔接种。收获48~96h尿囊液。3细胞培养：在鸡胚中适应610代后，接种鸡胚肝，肺，肾细胞，气管轮培养物增殖，产生包涵体，产生CPE。（四）鉴定1中和试验VN2HIHA3琼脂扩散4荧光抗体5ELISA一、猪呼吸与繁殖综合征病毒PRRSV(一)致病性引起母猪发生繁殖障碍及呼吸症状等。感染猪表现为厌食，发热，耳发绀(过去称蓝耳病)流涕，母猪在怀孕110天流产，可见早产，死产，木乃伊胎，不死的猪崽