雌激素通过雌激素受体β上调IL-6分泌促进非小细胞肺癌进展.pdf_第1页
已阅读1页,还剩63页未读 继续免费阅读

下载本文档

版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领

文档简介

1、目的:肺癌是世界上死亡率最高的恶性肿瘤,其中非小细胞肺癌(NSCLC)占肺癌总数85%左右。已有大量文献报道白介素-6(IL-6)是NSCLC中关键的肿瘤促进细胞因子。前期研究发现雌激素主要通过雌激素受体β(ERβ)在NSCLC的进展中起重要促进作用。已有研究证实雌激素与 IL-6信号通路相互作用,协同促进乳腺癌、卵巢癌等雌激素靶器官肿瘤的进展。但在雌激素非靶器官肺癌中雌激素和 IL-6有无相互作用还未见报道,雌激素是否能够调节NSCL

2、C细胞IL-6的分泌还不得而知。本研究首先检测ERβ与IL-6在NSCLC组织中的表达和相关性,然后在体外实验中探讨NSCLC中雌激素对IL-6分泌的调控及其可能的机制,为NSCLC内分泌和免疫治疗策略提供新的理论基础和方向。
  方法:本课题分两部分进行研究:
  第一部分在人NSCLC组织中检测ERβ和IL-6的表达,分析其表达相关性和共表达与临床病理特征的关系。应用组织芯片技术和免疫组化方法,检测2012年2月-201

3、4年2月我院手术的103例NSCLC肿瘤组织和98例癌旁正常肺组织中 ERβ和 IL-6的表达。应用卡方检验分析 ERβ和 IL-6表达与NSCLC临床病理特征的相关性,用Spearman等级法分析ERβ和IL-6之间表达的相关性。
  第二部分在体外实验探讨NSCLC中雌激素通过ERβ对IL-6分泌的影响及其可能的机制:1.NSCLC细胞系A549分别给予不同浓度梯度(1nM,10nM,100nM)17β-雌二醇(17β-est

4、radiol,E2,ER配体)处理,用ELISA法检测细胞培养上清中IL-6的含量,以探讨IL-6分泌是否与雌激素浓度相关;2.将NSCLC细胞系A549分为7组:空白对照(con)组、E2组、PPT(ERα特异性激动剂)组、DPN(ERβ特异性激动剂)组、氟维司群(Fulvestrant,Ful,雌激素抑制剂)组、E2+Ful组、DPN+Ful组,ELISA法检测细胞培养上清中IL-6的含量,Western-blot检测细胞内IL-6

5、表达,以探讨雌激素通过ERβ调节IL-6分泌和表达;3.将NSCLC细胞系A549分为6组处理:空白对照(con)组、E2组、Ful组、E2+Ful组、E2+IL-6组、 E2+Ful+IL-6组,检测细胞增殖(CCK8),以探讨雌激素上调IL-6分泌对细胞增殖能力的影响;4.将NSCLC系A549分为6组处理:con组、E2组、Ful组、E2+Ful组、E2+Ful+MAPK抑制剂(U0126)组、 E2+Ful+PI3K(LY294

6、002)抑制剂组,Western-blot分别检测t/pMAPK、t/pAkt的表达,ELISA法检测细胞培养上清中IL-6的含量,以探讨雌激素上调IL-6分泌的可能机制。
  结果:通过组织芯片-免疫组织化学技术检测发现:NSCLC中ERβ表达阳性率为91.3%(94/103),癌旁正常肺组织中ERβ表达阳性率为57.1%(56/98),NSCLC中ERβ显著过表达。在NSCLC中IL-6表达阳性率为89.3%(92/103),

7、癌旁正常肺组织中IL-6表达阳性率为42.9%(42/98);NSCLC中IL-6显著过表达。NSCLC中ERβ1、IL-6共表达阳性率为82.5%(85/103),显著高于癌旁正常肺组织中ERβ、IL-6共表达阳性率22.4%(22/98)。Spearman等级法分析ERβ与IL-6表达有正相关性,尤其在肺鳞癌中ERβ表达与IL-6表达有显著相关性。
  在体外实验中发现:1. NSCLC细胞系A549给予不同浓度梯度E2,细胞

8、培养上清中IL-6的含量随E2浓度的增加而增加,E2诱导的促IL-6分泌作用可被其受体阻断剂氟维司群(ful)阻断,提示雌激素能够促进肿瘤细胞分泌IL-6;2.E2、DPN促进细胞内IL-6蛋白的表达和培养液中IL-6分泌,E2+Ful、DPN+Ful组细胞内IL-6表达和上清IL-6分泌较E2、DPN组明显下降,同时发现PPT组IL-6蛋白的表达和培养液中IL-6分泌与对照组无明显差异,提示雌激素通过ERβ调节IL-6分泌和表达;3.

9、细胞增殖的能力在E2组中较对照组明显增强,E2+IL-6组细胞增殖能力较E2组增强,加入Ful后E2的促进增殖作用被抑制,提示雌激素可能通过上调IL-6分泌促进细胞增殖;4. pMAPK、pAkt在E2组表达升高,在E2+Ful、E2+Ful+MAPK抑制剂、 E2+Ful+Akt抑制剂组中下降,同时发现培养液上清中IL-6的含量在E2+Ful、E2+Ful+MAPK抑制剂、 E2+Ful+Akt抑制剂组下降,提示雌激素通过ERβ激活M

10、APK和Akt通路上调IL-6分泌。
  结论:在这项研究中发现,ERβ与IL-6在NSCLC组织中存在过表达,ERβ表达与IL-6的表达在NSCLC组织中具有正相关。雌激素能够通过ERβ促进NSCLC细胞IL-6分泌,进而促进NSCLC细胞增殖,其机制可能与激活MAPK和Akt信号通路有关,因此认为ERβ可能通过激活IL-6免疫信号通路而在NSCLC发生发展中发挥重要作用,这可能是雌激素促进NSCLC进展的重要机制之一,更进一步

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 众赏文库仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论