球结膜微循环在兔系统性硬化肺动脉高压中的意义及VEGF的相关性研究.pdf

背景和目的：　　肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension，PAH)是一类病因复杂、预后较差的疾病。特别是结缔组织病（connective tissue disease，CTD）相关PAH，其起病隐匿，诊断不充分，在临床诊疗中仍是难点。微循环障碍是系统性硬化（systemic sclerosis，SSc）发病机制中的中心环节，两者间的相关性也越来越被认可。由于临床研究的众多局限，动物模型对疾病发病机制及诊疗手段的探索提供了极大的帮助。本研究拟用博来霉素（ bleo myc in， BLM）联合野百合碱（monocrotaline，MCT）诱导模拟SSc合并PAH发病机制的兔模型，探讨球结膜微循环与PAH的联系，及其在疾病中的早期预测价值。同时，血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）既往已被多个研究证实在微循环障碍、血管重塑中发挥重要作用。本文试图在动物模型中，对 PAH、球结膜微循环分析及 VEGF水平的相关性进行讨论，进一步探索球结膜微循环在 SSc合并PAH中的意义。　　方法：　　1.选取新西兰雄兔24只，随机分为三组（溶剂对照组、模型组、激素组），每组8只。模型组及激素组分别一次性腹腔注射1％的MCT50 mg/k g及每日腹部皮下注射 BLM100ul（浓度1mg/ml），激素组同时每日腹腔注射甲泼尼龙（methylprednisolone，MP）2.6mg/kg（浓度1mg/ml），三周后停止给药。随后，利用右心导管测量平均肺动脉压（mean pulmonary arterial pressure，mPAP），与溶剂对照组对比，判断造模是否成功。并通过测量右心室肥大指数（ right ventricular hypertrophy index，RVHI）及完善组织病理，进一步评估模型是否符合SSc合并PAH病理特点。　　2.给药前后进行球结膜微循环分析，利用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清 VE GF表达。分析球结膜微循环积分、VE GF浓度及 mPAP的相关性，并利用ROC曲线判断球结膜微循环积分对SSc合并PAH的诊断价值。　　结果：　　1.模型组mPAP及RVHI均显著高于溶剂对照组和激素组，有统计学意义（P＜0.05）。　　2.组织病理：皮肤染色显示，模型组皮损处表皮萎缩并角化过度，真皮层出现少量淋巴细胞、浆细胞浸润；肺组织染色显示，模型组肺泡内可见大量出血，细小动脉肌化并不规则增厚，形成丛样结构，伴有淋巴细胞、浆细胞浸润。　　3.结膜微循环分析显示，模型组总积分较其他两组有明显差异（P＜0.05），主要表现在血管增粗、血管扭曲、网状畸形、出血、血管色调等方面，以上项目均与mPAP成正相关（P＜0.05）。　　4.球结膜微循环总积分ROC曲线分析，曲线下面积为0.852（P＜0.05）。总分5.2分对应的正确诊断指数最大，把球结膜微循环总积分≥5.2分作为辅助诊断PAH的分界点，其敏感度为88.9%，特异度为75.0%。　　5.模型组血清VEGF浓度较其他两组有显著差异（P＜0.05），并与球结膜微循环总积分及mPAP成正相关（P＜0.05）。　　结论：　　1.新西兰雄兔利用BLM联合MCT注射可以成功模拟SSc合并PAH模型。　　2. SSc合并PAH存在球结膜微循环障碍，其严重程度与mPAP成正相关，特别是在血管增粗、血管扭曲、出血、网状畸形、血管色调等方面。　　3.球结膜微循环总积分≥5.2分可以作为辅助诊断PAH的分界点，其敏感度为88.9%，特异度为75.0%。　　4. SSc合并 PAH中血清 VEGF水平有所升高，并与球结膜微循环总分、mPAP有一定的相关性。