辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢-还原酶亚细胞定位分析.pdf

1、辅酶Ⅱ依赖性视黄醇脱氢/还原酶（NADP(H)-dependent retinol dehydrogenase/reductase, NRDR）由位于染色体14q11.2的基因 DHRS4编码，是短链脱氢还原酶（Short-chain dehydrogenase/reductase，SDR）家族的一员，参与细胞内许多物质的氧化还原反应。NRDR具有很高的视黄醇氧化、视黄醛还原活性，能够催化视黄醇和视黄醛转换，参与维甲酸代谢，由于其活性依

2、赖于NADP(H)的存在，因此命名为NADP(H)依赖性视黄醇脱氢/还原酶。NRDR在哺乳动物组织中分布广泛，肝脏中表达水平比较高。
　　人NRDR能够还原α-双羰基化合物、芳香酮、对位苯醌及醛。而人NRDR对某些具有重要的生理功能物质（如5α/β-3-酮雄甾烷、5β-3-酮孕甾烷、脱氧胆石酸、睾酮、5α-孕甾烷-3，20-二酮等）的还原活性提示，NRDR可能参与人类重要的生理生化过程，其表达异常可能与某些疾病的发生、发展密切相关

3、。
　　NRDR是羰基还原酶（CR）家族的一员，CR催化NAD(P)H介导的羰基化合物还原为其相应的二级醇。哺乳动物组织中，CR以多种形式分布于细胞的线粒体、微粒体和/或细胞浆中。许多哺乳动物的羰基还原酶属于SDR家族。
　　人NRDR的mRNA5’端有两个翻译起始位点（translational initiation site，TIS），并且这两个TIS位于同一个开放阅读框（Open Reading Frame，ORF）内

4、，因此从理论上讲，可以产生两种翻译产物：从第一个TIS开始翻译得到含有278个氨基酸的蛋白质，命名为NRDR278，其氨基（N）端含有27个氨基酸组成的线粒体定位信号（mitochondrial targeting signal，MTS），羧基（C）端含有由Ser-Arg-Lys三肽序列组成的1型过氧化物酶体定位信号（Peroxisome targeting signal type1，PTS1），理论分子量为29.5kDa；从第二个TI

5、S开始翻译则得到较小分子量的蛋白质NRDR260，由于N端截短，导致其N端的MTS丢失，但由于阅读框架并未漂移，因此保留了C端PST1，NRDR260的理论分子量为27.3kDa。我们的前期研究发现，在正常人的肝脏组织，可以检测到两个条带，而人肝细胞HL-7702中有三条带，我们推测可能分别为NRDR278，NRDR260和NRDRB1，认为NRDR260和NRDR278都有表达，其中NRDR260表达比较高，组织中多为NRDR260。

6、我们认为，两个翻译起始位点都可以起始翻译，产生两种不同分子量的NRDR。其亚细胞定位的分布机制可能因N端序列不同而不同。
　　由于NRDR的羧基末端存在PTS1过氧化物酶体定位信号，生物化学技术和组织化学技术分析结果及蛋白信息库注释其为过氧化物酶体蛋白。我们通过线粒体、过氧化物酶体细胞器分离纯化，并检测其中NRDR的表达，结合免疫荧光，实验结果显示 NRDR双定位于线粒体和过氧化物酶体。双定位蛋白在不同的亚细胞组分中可能有相似或完