鸡贫血病毒(CAV)vp1基因克隆与表达的研究.pdf_第1页
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1、山东师范大学硕士学位论文鸡贫血病毒(CAV)vp1基因克隆与表达的研究姓名：张刚申请学位级别：硕士专业：动物学指导教师：李云龙2001.4.30鸡贫血病毒vpI爷因克隆i.j表达的研究鸡贫血病毒(CAV)vpl基因克隆与表达的研究摘要鸡贫血病毒(chickenanemiavirusCAV)是鸡传染性贫血病(chickeninfectiousanemiaVIA)的病原，属圆环病毒科(Circoviridae)o(CAV基因组编码三种蛋白:

2、VP1(51.6KD)VP2(24.OKD)VP3(13.6KD)，其中VPl是CAV的唯一衣壳蛋白，是CAV的保护性抗原，与VP2共同诱导鸡产生免疫保护作用。尹本研究根据CAVvpl的基因序列设计合成一对引物，通过PCR方法对vpl基因进行扩增，并把vpl基因连接到克隆载体PUC18上，在大肠杆菌DI15a中进行克隆。用末端双脱氧终止法测定vpl基因的序列，证明vpl基因共含1347bpoDNABlast分析表明，该基因与GeneBa

3、nk中已发表的vpl基因序列的一致性为95%左右，具有较大差异。这些差异导致vpl基因编码蛋白的氨基酸发生改变。把克隆的vpl基因亚克隆到表达载体pET30(b)上，并在大肠杆菌DE3中用IPTG诱导表达。SDSPAGE电泳鉴定证明VPl蛋白成功表达，其分子量为51.6KDovpl基因的成功克隆与表达，为VPl蛋白的免疫学研究和CAV基因工程疫苗的研制奠定了基础。关键词:鸡贫血病颧CAV)(PCR)，基因克隆丫vpl，八合酶链式反了表达

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