儿茶素对6-OHDA诱导的PC12细胞凋亡及线粒体PT孔开放的影响.pdf

1、浙江大学硕士学位论文儿茶素对6OHDA诱导的PC12细胞凋亡及线粒体PT孔开放的影响姓名：金超芳申请学位级别：硕士专业：茶学指导教师：沈生荣2001.5.1中文摘要以神经毒素6OHDA诱导PCI2细胞凋亡长期被用作PD研究模型。由于氧应激在PD发病中起重要作用，本研究旨在探讨天然抗氧化剂茶多酚(GTPs)及其主要的儿茶素单体成分如EGCG，ECG，EGC，EC和()C等是否有神经保护作用，从而探讨它们是否有作为PD新药研究及应用的前景。

2、本研究利用细胞生物、生化等技术研究茶多酚及其单体对6OHDA诱导的多巴胺能细胞株PCI2细胞凋亡的作用，并比较不同单体的作用效果，根据单体的分子结构及生化特性来探讨其作用机理。f细胞存活率实验表明6OHDA可时间剂量依赖性地损伤PCI2细胞；倒置相I差豆钡镜观察表明，PCI2细胞受损后，细胞变圆，贴壁状态变差：荧光显微镜观察细胞核染色体变化显示，正常细胞核质均一呈浅蓝色，而出现凋亡时，细胞核固缩，染色质凝聚，DNA聚集成亮点。有些可观察

3、到凋亡小体；DNA电泳出现典型的DNA梯状条带。在6OHDA处理前提前30min／JⅡ入不同剂量的保护剂，对6OHDA造成的上述细胞损伤有不同的作用。流式细胞术检测细胞凋亡率结果表明GTPs，EGCG和ECG表现出剂量依赖的保护作用，且在0204mM时保护作用最好：EC和()C保护作用不明显；EGC则表现了剂量依赖的轻微损伤作用。荧光及DNA电泳的结果也表明GTPs，EGCG和ECG保护效果最好。儿茶素对PCI2细胞的保护作用依次为：E

4、CG溯GG珊sI’C()CEGC。对线粒体膨胀及线粒体膜电位的研究发现，儿茶素对线粒体损伤有不同的调节作用，表现为：ECG，EGCG和OTPs对Ca2和H202导致的线粒体通透性改变有抑制其膨胀的作用：而EC，(斗C和EGC却有促进作用。OTPs对ca2诱导的线粒体Ca2释放随加入时间不同，表现有抑制和加速释放的双重作用：与ca2同时加入，它们可抑制线粒体对Ca2的吸收和线粒体Ca2的释放；在线粒体吸收ca2达到最大时加入GTPs，则它