油酰乙醇胺对脂肪肝细胞模型的作用及机制.pdf

1、　　目 的：在脂肪肝细胞模型建立的基础上,首次探讨油酰乙醇胺(oleoylethanolamide OEA)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)体外细胞模型的作用及可能机制。
　　方法：以HepG2细胞为研究对象,给予不同浓度的医用静脉滴注脂肪乳剂(MFE)和10%胎牛血清的低糖DMEM培养基培养HepG2细胞24小时,通过MTT法测定细胞活性,结合油红0染色及细胞内甘油三酯的测定,确定NAFLD体外模型的建立。模型确立后给予OEA及

2、阳性对照药非诺贝特6、12、24小时。药物干预结束,提取细胞总RNA,并反转录,通过实时定量PCR检测脂代谓}及脂肪肝相关炎症基因的表达,同时检测细胞内甘油三酯(TG)含量,及油红O染色观察细胞内脂滴蓄积情况。
　　结 果： (1)通过油红O染色、TG的测定及结合MTT结果显示：稀释20倍MFE对细胞活性无显著影响,且细胞内TG显著升高,细胞内脂滴蓄积明显,是诱导细胞脂肪变性的最佳浓度。(2)TG含量测定：OEA 12小时处理组

3、与模型组细胞内TG含量显著下降(P

4、较模型组表达显著降低(P　　结论：I%MFE培养HepG2细胞24小时,可诱导细胞脂肪变,可作为脂肪肝细胞模型：OEA通过激活脂代谢基因PPAR.cc、Sirt.1、CPT-1的mRNA表达,下调SREBP.1c及炎症基因TNF.a的表达,从而缓解HepG2细胞脂肪变,减少细胞内脂滴,因此OEA对脂肪肝细胞