TK基因突变试验——三种人类淋巴母细胞的比较及两类突变集落形成的机理研究.pdf

1、四川大学博士学位论文TK基因突变试验——三种人类淋巴母细胞的比较及两类突变集落形成的机理研究姓名：帅培强申请学位级别：博士专业：营养与食品卫生学指导教师：张立实20050507四川大学博士学位论文集落主要源于小的突变，如点突变，移码突变，而小集落主要由于大的片断丢失，影响到了一些与生长相关的基因。有学者提出可以根据小集落比例判断诱变物的类型，但是也有学者对此持反对意见，至今尚无定论。本研究的目的是优选一种相对最佳的人类淋巴母细胞应用于T

2、 K 基因突变试验系统，并从多个方面探讨正常生长和缓慢生长集落的形成机制，为T K 基因突变试验的推广积累更多资料。本课题分为以下三部分：第一部分：T K 6 - E 6 细胞在T K 基因突变系统中的应用。目的是为了评价该细胞系应用于T K 基因突变试验的优劣。结果显示，T K 6 - E 6 细胞在本实验室条件下测得的倍增时间为1 6 ．0 3 _ + 0 ．6 1 h ，自发突变频率为2 9 ．9 ±5 ．4 7 x 1

3、 0 。6 ，平板接种效率为6 3 ．8 奎4 ．6 ％，突变频率测定的平板的最适接种细胞量为t o o o o ／孔，阳性对照M M S 的适宜浓度为1 ．2 5 1 ^ g ／m l 。用T K 6 - E 6 细胞作为T K 基因突变试验的靶细胞检测三种常规诱变剂( M M S 、M M C 、N 龇) 和一种非诱变剂( K C l ) ，结果表明三种诱变剂均为明显阳性反应，而K C I 为阴性结果。提示T K 6 - E 6 细

4、胞作为T K 基医突变试验的靶细胞有较好的应用前景。第二部分：W T K l 、T K 6 和T K 6 - E 6 三种人类淋巴母细胞在T K 基因突变试验中的应用比较。目的是为了选择一种相对最优的人类淋巴母细胞，为将其推广应用于T K 基因突变试验系统积累资料。方法是使用这三种细胞检测三种常规诱变剂( M M S 、M M C 、N A N 3 ) 和一种非诱变裁( K c l ) 。结粜表明，三种细胞中以W T K l 细胞的自发