2023年全国硕士研究生考试考研英语一试题真题(含答案详解+作文范文)_第1页
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文档简介

1、5-羟甲基糠醛是食品中由还原糖经酸催化降解或通过美拉德反应而形成的一种物质。至今为止,虽然5-羟甲基糠醛的毒性仍处于争议过程中,但是它的含量经常作为衡量碳水化合物含量丰富的食品在经过热处理或贮存时间长时质量破坏程度的一个指标。所以食品中5-羟甲基糠醛的检测方法仍然受到人们的普遍关注。为了便于分析检测食品中的5-羟甲基糠醛,本文建立了一种具有高灵敏度和高特异性的酶联免疫方法(ELISA)。
  为了得到针对5-羟甲基糠醛有特异性的抗

2、体,本研究分别利用5-羟甲基糠醛与琥珀酸酐,一代树状分子,二代树状分子和对苯二甲酸反应得到四种不同的半抗原,并与载体蛋白BSA和KLH结合制备了七种免疫原分别免疫新西兰大白兔,然后选出对于5-羟甲基糠醛特异性最强的抗血清,用ProteinA-Sepharose4B蛋白亲和柱纯化后得到特异性的抗体。为了检测实际样品中5-羟甲基糠醛的含量,必须研究具有好的灵敏度和450nm波长下合适吸光度值(最大吸光度值为1左右)的ELISA分析条件。经过

3、优化酶标抗原稀释倍数,抗体包被量,缓冲溶液pH,离子强度及封闭液五项参数,得到ELISA方法工作的最佳条件,并建立标准曲线。该方法的灵敏度(IC50)和检出限(IC15)分别是0.15±0.012mg/L和0.02±0.002mg/L。
  本研究通过对样品前处理条件的优化,消除了样品基质影响,得到一套简单可行的样品处理方法。并将建立的方法应用于焙烤食品法式小面包,薯片,法式软面包和麦香鸡块中5-羟甲基糠醛的检测,样品检出限是1-

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