2023年全国硕士研究生考试考研英语一试题真题(含答案详解+作文范文)_第1页
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文档简介

1、目的:目前线粒体钠钙交换体特异性阻断剂CGP37157对心肌细胞肌浆网钙释放、钙回摄的影响缺乏研究。因此,本实验旨在探讨CGP37157对心肌细胞钙循环的影响。
   方法:(1)心室肌组织ATP 含量的测定:32只雄性SD大鼠随机分组,每组8只。以含60μmol/L Ca2+台氏液(对照组)和含有CGP37157的台氏液(实验组)灌流心肌组织,分别灌流15min、30min、60min。灌流结束后,用剪刀剪取左心室少许心肌组织

2、,采用ATP 检测试剂盒(ATP Assay Kit)测定其中ATP的含量;(2)心肌细胞形态学观察:分组及心肌组织的灌流方法同(1),灌流结束后,用剪刀剪取左心室少许心肌组织,用于透射电子显微镜的制样及观察;(3)心肌组织cAMP 含量的测定:分组及心肌组织灌流方法同(1),灌流结束后,用剪刀剪取左心室少许心肌组织,应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中大鼠环磷酸腺苷(cAMP)水平;(4)静息期心肌细胞钙循环的测定:SD大鼠,每组1

3、0只,共两组。采用常规酶解法分离心肌细胞,Fluo-3/AM 负载心肌细胞,用激光扫描共聚焦显微镜观察;(5)收缩期心肌细胞钙瞬变的测定:SD大鼠,每组10只,共两组。采用常规酶解法分离心肌细胞,Fluo-3/AM 负载心肌细胞,用全细胞膜片钳-激光扫描共聚焦显微镜联机技术同步记录系统记录各组大鼠心肌细胞L-型钙电流(Ica,L)和胞浆内钙瞬变(即钙诱导钙瞬变),对照组不灌流CGP37157,实验组灌流CGP37157 (10μmol/

4、L);(6)统计学分析:利用SPSS11.5 统计软件进行数据处理,所有数据以均数±标准差(X±SD)表示,两组间均数的比较采用t 检验, 率的比较采用x2 检验。P<0.05为差异有统计学意义。
   结果:(1)透射电子显微镜形态学观察:CGP37157 引起心肌细胞线粒体结构异常,表现为不同程度的线粒体嵴溶解,并且作用时间越长,线粒体受损伤越重;(2)心室肌组织中ATP 含量的比较:对照组、15min、30min、60mi

5、n 各组测得的ATP的浓度依次是1.23±0.02 μM/L、0.75±0.01μM/L、0.44±0.02 μM/L、0.17±0.01μM/L,各实验组较对照组ATP 含量显著减少(n=10, P<0.05);60min组较30minATP 含量显著减少(0.17±0.01μM/Lvs0.44±0.02 μM/L, n=8, P<0.01);(3)心肌组织中cAMP 含量的比较:CGP37157 引起心肌组织cAMP的含量增加,对照

6、组15min、30min、60min 各组测得的cAMP的含量分别为791±35pMol/g、1101±55pMol/g、1525±40pMol/g、2017±60pMol/g;60min组较对照组cAMP 含量显著增加(n=8,P<0.05);(4)对静息期肌浆网钙循环的影响:钙释放速率实验组(5.02±0.015)比对照组显著增强(1.01±0.006,n=10,P<0.01);钙存储实验组(20.2±0.8)比对照组显著减小(0.

7、3±0.3, n=10, P<0.01);钙回摄速率实验组(1.08±0.15)与对照组没有差异(0.99±0.09,n=10,P>0.05);(5)收缩期心肌细胞的钙瞬变:Ica,L的电流密度实验组(2.02±0.16pA/pF)比对照组显著减少(0.69±0.07pA/pF, n=10, P<0.01);实验组(45.5±5.2)大鼠CICR 过程中钙释放的幅度显著低于对照组(23.2±4.8,n=10,P<0.01)。
  

8、 结论:CGP37157 导致心肌细胞钙循环的异常,原因可能为其导致线粒体受损和PKA通路异常。具体如下:(1)CGP37157 导致线粒体的损伤,表现为其结构受损和ATP 合成下降。(2)CGP37157 介导的线粒体损伤导致静息期心肌细胞钙循环异常,表现为促进肌浆网钙泄漏,但不影响其钙回摄。(3)CGP37157 导致cAMP 增加,导致PKA 激活增强,可能导致静息期肌浆网钙泄漏。(4)CGP37157 导致收缩期心肌细胞Ica

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