肾康注射液对他克莫司诱导的大鼠肾损伤的保护作用.pdf

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    编号:20190311113303952    类型:共享资源    大小:9.09MB    格式:PDF    上传时间:2019-03-13
      
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    8928612. 注射液 克莫司 诱导 大鼠 损伤 保护 作用
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    目的:探讨肾康注射液(SHENKANGSK)对他克莫司(TacrolimusTAC)诱导的肾损伤的保护作用及其机制。  方法:36只雄性SD大鼠随机分为4组(每组9只),正常对照组(VH组)0.25mLday橄榄油皮下注射和1mLday生理盐水腹腔注射肾康组(SK组)橄榄油0.25mLday皮下注射和SK1mlday腹腔注射他克莫司组(TAC组)TAC1.5mgkgday皮下注射和生理盐水腹腔注射他克莫司肾康(TACSK组):TAC1.5mgkgday皮下注射和SK1mlday腹腔注射,共4周。实验开始后每周测量大鼠体重变化,药物处理4周后将大鼠安置在代谢笼中,测水摄入量及24小时尿量后,采集大鼠尿液及血液标本,次日在麻醉下留取大鼠肾脏组织后处死大鼠,采用全自动生化分析仪测量血清肌酐(SerumcreatinineScr)及尿素氮(BloodnreanitrogenBUN),计算肌酐清除率(CreatinineclearanceCcl)酶联免疫吸附法检测尿8羟基脱氧鸟苷(8hydroxy2deoxyguanosine80HdG),利用PAS染色观察肾小球基底膜硬化指数(glomerulosclerosisGSI)Masson三色观察肾小管间质纤维化(TubulointerstitialfibrosisTIF)程度,免疫组化染色观察单核巨噬细胞表面特异性抗原(EctodermalDysplasia1ED1)、骨桥蛋白(OsteopontinOPN)、肾母细胞瘤蛋白抗体(WilmsTumProteinWT1)、8OHdG、锰超氧化物歧化酶(manganesecontainingsu2peroxidedismutase,MnSOD)和含半胱氨酸的天冬酸蛋白水解酶3(CysteinylaspartatespecificproteinaseCaspese3)的表达。免疫印迹方法观察肾组织中转化生长因子β1(Transfminggrowthfactβ1TGFβ1)、Caspase3、MnSOD、B淋巴细胞瘤2基因(Bcelllymphoma2Bcl2)和Bcl2相关X蛋白(BCL2AssociatedXBax)的表达,原位末端凋亡(TdTmediateddUTPNickEndLabelingTUNED染色法观察肾小管的凋亡细胞。  结果:1.与VH组比较,TAC组体重及Ccr减少,24小时水摄入量及尿量增加,与TAC组相比,TACSK组体重、水摄入量及尿量无明显变化,但Ccr升高(0.5±0.04vs0.6±0.03,P<0.05)2.与VH组相比,TAC组TIF程度、TGFβ1表达及PAS染色细胞数增加,与TAC组相比,TACSK组TIF程度、TGFβ1表达及PAS染色细胞数降低(TIF:11.8±2.5%vs4.6±0.8%P<0.05)、(TGFβ1:1.6±0.10%vs1.0±0.05%,P<0.05)、(PAS17.3±2.4%vs12.1±1.8%,P<0.05)3.与VH组相比,TAC组WT1表达降低,与TAC组相比,TACSK组WT1表达升高4.与VH组相比,TAC组ED1阳性细胞数及OPN表达增加,与TAC组相比,TACSK组ED1阳性细胞数(23.2±2.3个vs15.1±2.1个,P<0.05)及OPN表达下降5.与VH组相比TAC组尿及组织中8OHdG水平升高,MnSOD表达量降低,与TAC组相比,TACSK组尿及组织中8OHdG水平减少(尿8OHdG:230±14ngvs162±17ng,P<0.05)(8OHdG:15.7±2.3%mm2vs8.9±1.4%mm2,P<0.05),MnSOD表达量升高6.与VH组相比,TAC组Caspese3活性增加,Bcl2Bax比值降低,与TAC组相比,TACSK组Caspese3活性减少,Bcl2Bax比值升高(0.1±0.01vs1.0±0.02,P<0.05)7.与VH组相比,TAC组TUNEL阳性细胞数增加,与TAC组相比,TACSK组TUNEL阳性细胞数减少(10.2±2.0个mm2vs4.6±1.8个mm2,P<0.05)。  结论:SK对TAC诱导的肾损伤具有良好的保护作用,其机制可能与SK抑制炎症,抗氧化及抑制凋亡以及间质纤维化相关。
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    溺死温柔海上传于2019-03-13

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