产烷烃基因工程菌的构建.pdf

北京化工大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：颟日期：塑坚!：生关于论文使用授权的说明学位论文作者完全了解北京化工大学有关保留和使用学位论文的规定，即：研究牛在校攻读学位期间论文工作的知识产权单位属北京化工大学。学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以允许采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。口非暂不公开(或保密)论文注释：本学位论文不属于暂不公开(或保密)范围，适用本授权书。作者签名：、莠匆≯—————————————————————～导师签名：№日期：世’掣日期：Ⅻ珂。’。。。‘’。。。。。。。。。。。。。。。。。。’。。。’。。。。—。。。。。。。‘‘。。。。。。。。。。。。。。。。。。‘●。。。‘。。。。。。。。。。。。。。。。。一摘要产烷烃基因工程菌的构建摘要随着全世界范围内原油消耗量的激增，通过节能减排来实现可持续发展已经成为我们所必须关注的问题，因而关于如何用可再生生物质来替代化石能源，逐渐成为新生的热点课题。烷烃，是化石能源的主要组分，但迄今为止，学术界对于利用微生物这一“细胞工厂”来生产烷烃的研究仍涉及甚少。本课题利用基因工程及合成生物学领域的研究方法，通过调控烷烃生物合成过程中关键酶的表达，使微生物细胞只需通过简单的代谢就可以产生烷烃，为传统石化燃料造成的排放问题、新型生物燃料不能完全替代石化燃料等问题提供了一个绝佳的解决方案。产物中十一烷的生成是本课题的一项重大突破。本课题的研究工作主要围绕以下几个方面展开：()烷烃生物合成途径的构建及验证；分别扩增来源于不动杆菌两种不同菌株的酰基辅酶还原酶基因／，和来源于念珠藻的醛脱羰基酶基因，并构建成两套表达体系—以及——。在发酵过程中外源流加：／：的脂肪酸，并检测最终发酵液中是否含有目标产物烷烃，以验证所构建途径的可行性。最终结果显示含有和的代谢途径可以成功将脂肪酸转化成相应链长的烷烃，故在后续实验中对这条途径加以利用。