应用巴斯德毕赤酵母表达重组人TFPI.pdf

1、在多种疾病，例如，动脉粥样化损伤，癌症，败血症等中，组织因子(TF)扮演了很重要的角色，其介导的凝血及血栓形成导致疾病的发展及患者的死亡。而组织因子途径抑制因子(TFPI)作为组织因子的主要抑制因子，对血栓形成、感染性休克、血管再狭窄、内毒素血症和DIC等具有明显防治作用。因此，重组TFPI的研制具有很好的临床应用价值。目前的表达系统，例如，哺乳动物细胞、酿酒酵母及大肠杆菌由于成本，表达量等原因，在TFPI重组蛋白表达方面还存在一定欠缺

2、。本论文应用巴斯德毕赤酵母表达系统表达TFPI，以期获得表达量更高的TFPI重组蛋白表达系统。 本研究应用G418筛选出含有高拷贝TFPI cDNA的巴斯德毕赤酵母菌株GS115—rhTFPI-PPIC9K anti—G4184.0mg/ml，使重组TFPI表达量从0.211±0.023mg/L提高到了1.255±0.223mg/L。建立了采用发酵罐高密度培养重组酵母菌的实验室方法，使重组TFPI表达量提高了约5.45倍，达到