初步探索Foxp1及Ctgf在糖代谢调节中的作用.pdf

1、第一部分初步探索Foxp1在糖代谢调节中的作用
　　 长期的进化使得机体能够通过复杂的机制使血糖保持在一个相对稳定的范围内。这些机制包括肝脏通过糖原分解和糖异生产生葡萄糖，外周组织如骨骼肌、脂肪组织和内脏器官如肝脏清除葡萄糖。肝脏在生成和利用葡萄糖过程中起了重要的作用。过氧化物酶体增殖受体γ，共激活因子1α(PGC1α)是糖异生酶基因的上游调控因子，对于一些酶表达的激活发挥重要的调控功能。在糖尿病情况下糖异生过程被非正常开启。F

2、oxp1全称：forehead box p1属于Fox家族，是一种转录因子。Foxp1有一个翼状螺旋的DNA结合结构域和一个同源的依赖DNA结合的N末端转录抑制结构域。该基因的功能广泛，在心脏和肺的发育，B细胞的发育和巨噬细胞的分化中起到重要的作用，并且与恶性肿瘤发生有关。通过芯片分析发现Foxp1在不同的营养条件下以及在ob/ob，db/db小鼠中表达量都有明显的变化，于是推测该基因可能参与代谢过程。通过体内和体外实验，我们证明了Fo

3、xp1能够调节PGC1α、PEPCK、G6PC和GCK的表达。在小鼠肝脏原代细胞中，增加Foxp1的表达量，能够有效提高细胞对胰岛素的敏感性，对糖尿病造成的高血糖可能具有改善效果。本实验首次证明了Foxp1在机体糖代谢中发挥功能，或许为以后糖尿病的治疗提供线索。
　　 第二部分初步探Ctgf在糖代谢调节中的作用
　　 蛋白连接组织生长因子(CTGF)，又称之为CCN2，是一个36到38kDa富含丝氨酸的肝素结合蛋白，一个

4、高度保守CCN立早反应家族的一个成员。Ctgf基因过表达腺病毒构建及鉴定，初步探究Ctgf在糖脂代谢方面的功能。克隆Ctgf过表达质粒，定向克隆入穿梭载体pAdTrack-CMV，PmeⅠ酶切线性化穿梭质粒转化改造的EcoliBJ5183(含腺病毒载体pAdEasy-1)感受态细菌产生重组腺病毒载体，用PacⅠ线性化重组质粒，回收转染293A细胞包装病毒颗粒，经过三轮扩增，感染肝原代细胞，观察感染效率及检测基因表达情况。通过对小鼠不同时

5、间段的饥饿处理，提取肝脏RNA做RT-PCR，实时定量PCR来检测Ctgf基因在不同的营养条件下的变化情况。成功包装Ctgf的腺病毒，感染效率达到90％以上。Ctgf在不同的营养条件下，表达情况不同并且与糖脂代谢重要基因PGC1α表达情况一致。过氧化物酶体增殖受体y共激活因子1(PGC1α)是糖异生酶基因的上游调控因子，对于一些酶表达的激活发挥重要的调控功能。在糖尿病情况下糖异生过程被非正常开启。饥饿24h，Ctgf上调3．38+0．5