简介：分类号TS2019密级学校代码10057研究生学号13808967成品粮植物精油保鲜剂的研制与其应用研究DEVELOPMENTANDPRESERVATIONAPPLICATIONOFESSENTIALOILASAREFINEDGRAINPRESERVATIVE工程领域名称食品工程指导教师姓名李喜宏教授企业指导教师高凯高级工程师研究生姓名刘香军申请学位级别工程硕士论文提交日期2016年3月论文课题来源天津食品安全低碳制造协同创新中心学位授予单位天津科技大学摘要近年来，人们普遍使用磷化氢等化学杀菌剂来解决成品粮储藏过程中的虫害、霉变和陈化带来的成品粮严重损失问题。由于化学杀菌剂残留问题严重危害人类健康，而且，植物病原菌和害虫对化学杀菌剂产生抗药性，因此，在成品粮贮存保鲜领域，开发出天然无污染、对人体没危害的又省钱的专用保鲜剂是本领域的研究热点。植物精油具有很多的优点，如其没有毒性、对环境无污染、抑菌范围广、效能高等，但是植物精油在室温条件下不稳定，有非常强的挥发性，极易产生氧化分解现象，继而对精油的作用效果及品质有影响。在天津食品安全低碳制造协同创新中心的支持下本文针对植物精油及其主要抑菌物质易挥发和易氧化等技术难题以及成品粮化学杀菌剂残留问题严重的技术难题，采用包络结合法，以壳聚糖和13一环糊精为载体以及采用锐孔法，以海藻酸钠、壳聚糖为壁材，明确最佳配方和工艺参数，开发丁香精油微囊化保鲜剂和山鸡椒精油微囊化保鲜剂共2种，并首次对微胶囊进行缓释作用的包装。考察了微胶囊对以大米和大豆为代表的成品粮的品质指标的影响，为今后将植物精油微囊化保鲜剂应用于成品粮贮藏的开发应用提供理论依据。经过对配方及工艺条件的系统优化，从而确定了丁香精油微囊化保鲜剂在研制过程中的最优条件是壁材13一环糊精的浓度为6O％，壁材壳聚糖的浓度为10％，以及吐温80的浓度为02％；在电镜下观察到的微囊化保鲜剂的形状呈不定型状，大小不一，并且是粉末；通过对保鲜剂的释放过程进行检测得到的结果是其呈缓慢释放的状态；防霉性试验获得到的结果为保鲜剂具有防霉的特点。在0℃，15℃和30℃三个温度下，以大米为示例，对比放有包装好的丁香精油微囊化保鲜剂成品和没有放保鲜剂的作用效果，结果表明该保鲜剂在不同温度下的释放速率按大小排列依次为30℃15℃O℃，30℃的高温条件下此保鲜剂对贮存期间大米的保鲜效果最显明，而且30℃条件下此保鲜剂在大米脂肪酸氧化以及微生物调控两方面具有非常好的效果。山鸡椒精油微胶囊保鲜剂的研究及应用结果表明最佳优化条件为芯壁比14，搅拌速率800R／MIN，壳聚糖添加比例20％。对湿胶囊进行包衣后，室温下放置90天后，精油的挥发率为604％，而未包衣的挥发率为967％，由此可见包衣后的微囊颗粒能够延长精油的使用时间。不同温度条件下山鸡椒精油微胶囊保鲜剂应用于大豆的结果表明该保鲜剂对大豆的保鲜效果明显程度从大到小依次为30℃15℃0℃，30℃条件下，该保鲜剂对大豆的脂肪酸氧化和蛋白质的溶解比率具有显著的影响效果，从而保鲜效果明显。关键词保鲜剂；微胶囊；精油；成品粮

简介：近年来，海藻因其可以有效降低心血管疾病等慢性疾病的罹患风险而备受青睐，此外它还具有清除自由基能力和抑制癌细胞增殖等生物活性。血管紧张素转化酶ACE，EC34151能催化机体内血管紧张素Ⅰ转化成血管紧张素Ⅱ，而血管紧张素Ⅱ则作为一种强血管收缩剂，能迅速作用血管而引发升压效应同时，ACE可切除舒缓激肽C端的PHEARG，使其失去降血压的功能，最终导致机体血压上升。此外，由于机体内产生的氧自由基未被及时清除，将导致机体内细胞信号传导异常和DNA氧化损伤。目前，癌症也是危害人类健康较为严重的疾病，最常见的肿瘤为肝癌、结肠癌、乳腺癌及白血病等。现今，国内外研究都集中于对天然安全、无毒副作用的生物活性肽，它们具有抑制ACE活性而降低血压，清除氧自由基以减少氧化损伤和抑制癌细胞增殖等作用。红毛藻富含藻红蛋白，其含量是紫菜的45倍，故本研究以红毛藻为原料制备生物活性肽。本研究以红毛藻为原料，通过3550％硫酸铵盐析及DEAESEPHAROSE阴离子交换柱层析技术，纯化获得高纯度的R藻红蛋白，纯化系数A565A280为51。圆二色谱测定结果表明R藻红蛋白主要由Α螺旋结构组成。由R藻红蛋白的圆二色谱、紫外可见吸收光谱及荧光发射光谱检测可知，在不同PH及温度下R藻红蛋白构象发生改变。R藻红蛋白经体外胃肠模拟消化，所得消化产物ACE抑制活性IC50为1870ΜGML，ABTS自由基清除能力EC50为7699ΜGML，DPPH自由基清除能力EC50为4219ΜGML，羟基自由基清除能力EC50为324ΜGML和还原力A70005为6258ΜGML。因此，采用胃蛋白酶和胰蛋白酶对R藻红蛋白进行分步酶解，获得具有生物活性的藻红蛋白肽，测得分子量＜2KDA的小肽含量占899％。利用SEPHADEXG15凝胶柱及反相高效液相色谱对该活性肽进行分离纯化，并通过测定ACE抑制活性及ABTS自由基清除率对目标肽进行跟踪，最终纯化获得2个ACE抑制肽和3个抗氧化肽。经N端测序可知2个ACE抑制肽的氨基酸序列分别为ALLAGDPSVLEDR和VVGGTGPVDEWGIAGAR，其中ALLAGDPSVLEDR来自于R藻红蛋白Β亚基，VVGGTGPVDEWGIAGAR来自于Α亚基。根据氨基酸序列对该活性肽进行合成，并测定ACE抑制活性及抗肿瘤活性，发现合成肽ALLAGDPSVLEDR的ACE抑制活性IC50为701ΜGML，而VVGGTGPVDEWGIAGAR则为655ΜGML。抗肿瘤细胞实验结果表明，ALLAGDPSVLEDR对癌细胞增殖具有更好地抑制作用，其对HEPG2肝癌细胞增殖的抑制作用IC50为789MGML，对SMMC7721肝癌细胞增殖的抑制作用IC50为748MGML，而对CACO2结肠癌细胞增殖的抑制作用IC50为428MGML。本研究制备的藻红蛋白蛋白肽具有多种生物活性，在功能性食品的开发利用方面具有广阔前景。

简介：分类号UDC密级学校代码11845学号2111206002广东工业大学硕士学位论文工学硕士邻苯二甲酸二异丁酯的荧光免疫分析研究郑盛武指导教师姓名赵菌渲数援专业或领域名称化堂工程当技本学生所属学院轻工化工堂院论文答辩日期2Q15生鱼旦摘要摘要邻苯二甲酸二异丁酯属于塑化剂PES邻苯二甲酸酯类，作为工业材料加工助剂。于1950后大量应用于塑料制品的加工，主要用于增强材料的延展性、耐久性等加工性能。在缺乏相对完善的毒理学研究的情况下，添加了塑化剂的塑料制品大量地应用到食品包装行业、玩具业、医疗器械和家庭常用用品方面。近年来，大量的毒理学研究表明塑化剂邻苯二甲酸二异丁酯是一类环境雌性激素，这类物质进入人体后，可以影响人体正常分泌物的合成，释放，转运，结合等过程，进而阻碍人体的正常发育。因此，建立其免疫分析方法来实现快速检测食品中的二异丁酯污染具有十分重要的意义。目前邻苯二甲酸二异丁酯的检测手段主要有高效液相色谱、气相色谱，往往这些色谱分析方法和质谱联用。这类分析方法虽然可以很准确地测量出水或食品中邻苯二甲酸二异丁酯含量且检测限较低，但这类分析方法分析时间长、所需仪器昂贵、需要专业的人员进行分析操作且无法实现大批样品的快速检测。因此，很有必要开发一种简单、快速、可靠、灵敏、廉价的检测邻苯二甲酸二异丁酯的方法。免疫分析具有方便、成本低、灵敏度高等优点可以满足简单、快速检测邻苯二甲酸二异丁酯的检测要求。本文通过邻苯二甲酸结构类似物4一硝基邻苯二甲酸作为中间体，经过羧基酯化和硝基还原来获得具有邻苯二甲酸二异丁酯结构特征、同时得到可修饰氨基。再将得到的目标分子结构衍生物采用氨基重氮化与载体蛋白牛血清白蛋白BSA、鸡血清白蛋白OVA偶联分别制得免疫原和包被原。免疫抗原注射免疫新西兰兔，制备多克隆抗体，利用高灵敏度抗体建立塑化剂邻苯二甲酸二异丁酯的免疫分析方法。利用邻苯二甲酸二异丁酯多克隆抗体建立间接竞争荧光免疫分析方法，经过分析条件的优化，分析方法的线性范围为1047“35706NG／MLR0991，检测限为582NG／ML。将建立的分析方法应用到植物油样品中邻苯二甲酸二异丁酯的检测，一方面该方法的样品加标回收率为79“102％，另一方面利用该方法测得的油样邻苯二甲酸二异丁酯含量与传统GC～MS结果相关度较高，表明该方法适用于食品中塑化剂邻苯二甲酸二异丁酯的检测。关键词塑化剂；邻苯二甲酸二异丁酯；免疫分析；荧光

简介：学校代码10663学号4201111000499贵州师范大学学位论文用16SRDNAV4区高通量测序分析两种酒糟细菌多样性ANALYSISOFTHEBACTERIALDIVERSITYINTWODIFFERENTDISTILLERSGRAINSBYHIGHTHROUGHPUTSEQUENCINGOF16SRDNAV4专业名称生物化学与分子生物学专业代码10663研究方向特色资源分子生物学申请人姓名袁帅导师姓名乙引二零一四年五月

简介：硕士学位论文全日制学术学位PRTP编码的细胞外膜丝氨酸蛋白酶IACTOCEPIN对干酪乳杆菌粘附及免疫作用的影响黄宏轶指导教师姓名彭量副熬撞，扬刿盘堂，姿蒸扬刿，225QQ窆迕慧卿副熬撞，扬刿太鲎，姿苤扬刿，225QQ窆申请学位级别亟学科专业名称萱鲞当金墨里生堂论文提交日期2QZ生鱼旦论文答辩日期2Q12生旦学位授予单位扬刿盘鲎学位授予日期2Q12生鱼月答辩委员会主席型挂蕴整撞』一I净Ⅳ裂譬LI差大一埸一、5，＼必瞎2扬州大学硕士学位论文小肠粘液、细胞表面以及小鼠肠道的粘附。321858P御基因突变株21858A免疫效力研究研究发现21858能提升小鼠体重，且与对照组有显著差异PO05，21858对体重的提升效果好于21858A，时间越长效果越明显。21858和21858A对免疫器官的指数有特异性影响。21858和21858A对胸腺指数在短期内10D没有显著影响胗O05，但在较长期20D，21858和21858A高剂量组相对于对照组都有显著差异PO05，而其他各组相对于对照组无显著差异。且高剂量组胸腺指数相对中剂量组有显著差异，提示干酪乳杆菌对胸腺指数影响存在剂量依赖关系。对于脾脏指数，两种干酪乳杆菌在整个喂养阶段都有提高的作用，且提升效果具有浓度依赖性，浓度越高，提升越明显。21858提升效果优于21858A。说明21858对免疫器官的影响要优于21858A。对免疫细胞研究发现21858和21858A在饲喂的整个阶段均能提高小鼠淋巴细胞的转化率，且在相同时间和剂量下21858组的转化率高于21858A组。对巨噬细胞的活化研究提示21858能通过提高巨噬细胞的能量代谢水平或吞噬能力来活化巨噬细胞，增强其对抗原的处理能力。但21858A对巨噬细胞的活化没有明显提升作用，提示21858活化巨噬细胞能力要强于21858A。本研究通过流式细胞仪对小鼠CDLLC，CD80双阳性脾淋巴细胞进行检测。结果表明，两种受试乳酸菌在喂养小鼠的整个阶段均可持续提高CDLLCCD80双阳性细胞的数量，尤其在喂养后期，且21858组增强能力好于21858A组。提示干酪乳杆菌能提高小鼠免疫功能，PR护编码的细胞膜蛋白酶LACTOCEPIN对干酪乳杆菌菌提高免疫功能有重要作用。关键词干酪乳杆菌；∥垆基因；突变株；粘附性；免疫

简介：0ILUIIIIIIIIIIILUY3275144分类号一UDC。。。一学号密级全目制学术学位基因∥俨编码的细胞膜丝氨酸蛋白酶LACTOCEPIN对副干酪乳杆菌免疫调节的影响刘昭指导教师姓名崔挂盘塾撞，堑I盘堂望蒸扬刿，22122迕茎纽剑塾撞，扬刿盘堂，婆莶扬I，22兰122申请学位级别亟学科专业名称萱盎当金墨里生生论文提交日期2Q12生鱼旦论文答辩日期2Q12生旦学位授予单位扬刿盘鲎学位授予日期2Q12生鱼月答辩委员会主席题堡霞熬撞2017年6月季M文太啪论叩叭位■R■币埸一学士静扬州大学硕士学位论文变株主要都是定植在结肠，十二指肠中最少。在不同肠段，亲本株的粘附量均显著高于突变株尸001。采用CBA技术通过体内、外实验研究了受试乳酸菌对免疫器官、免疫细胞和免疫分子的影响。结果表明，发现亲本株与突变株都能在灌胃的中期提高小鼠的免疫器官指数，后期不明显；均能提高脾脏淋巴细胞转化率，但亲本株比突变株更显著；亲本株能显著提高巨噬细胞能量水平和吞噬能力P005，突变株作用不显著。亲本株和突变株高剂量时均可以增加机体对IFNO【的表达量尸O01，亲本株的表达效果更显著，亲本株可以增加机体对IL一10的表达量PO01，而突变株的作用效果不明显。亲本株可以增加机体对IFN一1，的表达量，且与剂量及时间有关，高剂量作用显著PO05，突变株作用不明显。两种受试乳酸菌在喂养小鼠的整个阶段均可提高CDLLCCD80卿TT性细胞的细胞的数量。关键词副干酪乳杆菌；基因敲除；LACTOCEPIN；粘附特性；免疫调节

简介：分类号密级UDC学号405611612100南昌大学硕士学位研究生学位论文优良优良嗜酸乳杆菌的选育及其菌剂制备技术研究嗜酸乳杆菌的选育及其菌剂制备技术研究SCREENINGIDENTIFICATIONOFLACTOBACILLUSACIDOPHILUSSTUDYONITSPREPARATIONOFMICROGANISMBACTERIUMAGENT王昕悦培养单位（院、系）食品学院食品科学与工程系指导教师姓名、职称熊涛教授申请学位的学科门类工学类学科专业名称发酵工程论文答辩日期2015年05月30日答辩委员会主席评阅人2015年05月30日摘要II摘要人体微生态系统的平衡稳定对人体身体健康有着非常重要的意义，是维持健康的必要因素之一；嗜酸乳杆菌在其中扮演着重要角色，对人体有强大的益生功能。经过长时间的演化，不同宿主来源的嗜酸乳杆菌对宿主细胞黏附具有特异性；因此筛选一株能耐受胃肠道恶劣环境、抑菌能力强、黏附性能好的优良人源性嗜酸乳杆菌，是开发功能性食品、活菌制剂、保健药品等产品的关键。高密度培养技术和真空冷冻干燥技术是乳酸菌菌剂制备的核心技术；优化嗜酸乳杆菌的高密度培养工艺和真空冷冻干燥技术能提高生产效率，保证产品标准化，维持产品稳定性，延长货架期。本研究首先利用低PH环境和高胆盐浓度环境从7个714天内健康新生儿新鲜粪便样品中筛选获得8株耐酸耐胆盐性能优良的革兰氏阳性杆菌菌株。利用菌落形态、生理生化特征和分子生物学鉴定，筛选出2株嗜酸乳杆菌，分别命名为嗜酸乳杆菌LANCU401和嗜酸乳杆菌LANCU402。针对LANCU402进行益生功能的研究发现LANCU402对模拟胃肠道环境的抗胁迫能力强，人工胃肠液作用12H后，活菌浓度仍保持在107CFUML以上；对CACO2细胞系具有较好的黏附性能，黏附指数达952140CACO2；抑菌方面LANCU402对常见致病菌有较好的抑制作用，对益生菌的生长没有影响；LANCU402与嗜酸乳杆菌ATCC4356有相似的抗药性，具有一定的抗药性能。本文通过高密度培养技术和真空冷冻干燥技术的优化对LANCU402菌剂制备技术进行研究。采用FFD、SA和CCD试验设计对增菌培养基进行优化，得到优化培养基为葡萄糖15、蛋白胨1、牛肉膏14584、酵母粉04、柠檬酸三铵02、K2HPO402、MGSO47H2O002、MNSO44H2O0005、NAAC3H2O05、乳糖17665、番茄汁316029、吐温8001；以活菌浓度为响应值，对LANCU402高密度培养条件优化确定为接种量4，培养温度设定为37C培养22H后以33C培养2H，碱流加中和剂为氨水，培养PH为62；以此培养LANCU402的活菌浓度可达到44967109CFUML。对真空冷冻干燥技术优化后，确定菌剂制备关键技术为发酵液离心参数4500RPM、15MIN，冻干保护剂为7海藻糖和16脱脂乳粉，冻干样品厚度为4MM，以此条件真空冷冻干燥的LANCU402菌粉的冻干存活率可达9028，在室温、4C

简介：分类号____________密级______________ＵＤＣ____________单位代码______________硕士专业学位论文论文题目红藻糖苷的抗氧化活性及其对超低温冻存微藻的保护作用学号_________________________姓名_________________________专业学位类别________________________专业学位领域________________________学院_________________________指导教师_________________________合作导师_________________________论文提交日期2016年05月16日李九零116461311085093工程硕士陈海敏研究员食品工程海洋学院赵丽娟高级工程师独创性声明本人郑重声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得宁波大学或其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处，本人愿意承担相关法律责任。签名___________日期____________关于论文使用授权的声明关于论文使用授权的声明本人完全了解宁波大学有关保留、使用学位论文的规定，即学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。（保密的论文在解密后应遵循此规定）（保密的论文在解密后应遵循此规定）签名___________导师签名___________日期____________

简介：蛋白酶抑制剂（TRYPSININHIBIT，TI）是大自然中普遍存在的一类活性物质，有着卓越的抗真菌能力和植物抗病虫功能。其保健功能和在抗癌领域的应用也越来越受到人们的关注，最近发现TI与癌症的发生有很多内在联系。豆类是蛋白酶抑制剂的重要来源，黑豆是豆类的重要组成部分，又是众所周知的健康食品，但以往对于黑豆中胰蛋白酶抑制剂的研究报道有很多空白，因此有必要对黑豆中的胰蛋白酶抑制剂进行深入研究。本文旨在对黑豆中的一种胰蛋白酶抑制剂进行提取、纯化及活性鉴定。方法黑豆粉碎后经石油醚脱脂，40％60的硫酸铵分级沉淀，再经脱盐柱，DEAEFF阴离子柱、SEPHACRYLTMS100HR凝胶柱进一步纯化后，经酶活性测定，收集获得目的蛋白。通过SDSPAGE凝胶电泳和质谱鉴定，确定其相对分子量，并通过福林酚法测定蛋白浓度。对黑豆胰蛋白酶抑制剂理化性质的研究主要包含温度、PH、金属离子对黑豆胰蛋白酶抑制剂抑制活性的影响；通过LINEWEAVER–BURK作图法和DIXON作图法，对胰蛋白酶抑制剂进行动力学表征，确定其抑制剂类型和与酶作用强度；黑豆胰蛋白酶抑制剂的生物活性表征主要包括两方面抑制癌细胞增殖能力的测定和抗真菌活性实验。获得如下结果1、从黑豆中纯化得到一种具有几丁质酶活性的胰蛋白酶抑制剂（BLACKSOYBEANTRYPSININHIBIT，BSTI），经SDSPAGE和质谱鉴定，其分子量为203KD，PI值为46，数据库同源性分析显示其与大豆胰蛋白酶抑制剂同源性达49。并测得其具有几丁质酶活性，活性强度为2469UMG。福林酚法测得蛋白浓度为0409MGML。2、BSTI表现出很好的热稳定性，在100℃处理1H其抑制活性依然达到80以上；BSTI在酸性和中性条件下比较稳定，但在碱性条件下随着PH的增大其稳定性逐渐减弱；FE3、MN2、CA2对BSTI的活性有抑制作用，且MN2的抑制效果最明显，而FE2、ZN2、K、MG2对抑制剂的活性有激活作用，且MG2的激活能力最强；按LINEWEAVERBURK作图法，得到胰蛋白酶与BAPNA反应的线性方程Y13867X1011，KM137127MMOLL。其KM与BSTI存在并起作用时胰蛋白酶和底物作用KM＇的值相同，可以判断BSTI为非竞争性抑制剂类型；用DIXON作图法，得到BSTI的动力学线性方程Y19725X17357，抑制常数KI88103MMOLL。KI远小于KM，说明BSTI具有很强的胰蛋白酶抑制剂活性。3、通过MTT初步筛选发现，当BSTI浓度在0150ΜGML时对乳腺癌MCF7细胞的抑制效果不明显，当浓度达到200ΜGML以上时，开始表现出对MCF7的抑制作用，且具有浓度依赖性；当浓度达250ΜGML表现出对肝癌HEPG2细胞的抑制能力，以上结果初步表明BSTI在浓度为250ΜGML以上时，对MCF7和HEPG2细胞的增殖具有一定的抑制作用。通过抗真菌实验检测发现，BSTI对木霉和尖孢镰刀菌的生长有明显的抑制作用。本文提取、纯化出一种黑豆胰蛋白酶抑制剂，并对其进行了酶学特性的测定和生物活性的检验，实验结果为黑豆胰蛋白酶抑制剂的后期开发及其工业化应用积累科研和生产经验。

简介：由于草浆等纸浆存在滤水性差、强度低等缺点，使其应用受到限制，一般生产过程中需要对其进行改性以改善滤水和强度性能。与化学法改性相比，采用纤维素酶主要是内切酶EG处理对纸浆改性是一种环境友好的技术，且已被证明在改善纸浆滤水性，提高成纸强度等方面具有良好效果。由于制浆造纸工艺往往在中、碱性条件下进行，这就要求使用的酶能够在高PH条件下维持酶活性，保证其催化作用有效进行。但市场上已有的商品纤维素酶大多为酸性酶，在碱性条件下酶活很低。虽然国内外对碱性纤维素酶的研究正逐渐深入，但目前仍存在很多问题，例如，已有产碱性纤维素酶菌株的产量低、酶系不合理、酶改性机理尚未完全清楚等。因此，设法提高碱性纤维素酶产量，合理优化酶系，以降低纤维素酶生产成本和提高对纸浆的改性效果，同时深入研究酶法改性机制等，对促进酶在造纸工业中的应用，降低生产成本等具有重要意义。基于以上背景，本论文在实验室前期研究基础上，通过构建耐碱性纤维素酶菌株，以希望提高纤维素酶产量同时通过构建耐碱性纤维素酶与木聚糖酶共表达菌株，以达到优化改性酶系、提高酶法改性效果的目的同时从不同角度研究了纸浆酶法改性的机制。本论文主要研究内容和结果如下1耐碱性纤维素酶的表达及其对纸浆改性效果研究为获得适合纸浆改性用的耐碱性纤维素酶，在实验室前期研究基础上，扩增来源于特异腐质霉的三个耐碱性内切纤维素酶HEGI，HEGII，HEGV的基因，并在毕赤酵母GS115中成功异源表达同时在大肠杆菌BL21中成功异源表达了来源于不同芽孢杆菌的三个内切纤维素酶Y106EG，Z16EG及A30EG。测定纯化后重组耐碱性纤维素酶的性质，发现这六种内切纤维素酶的最适PH在6575左右，最适温度在50℃60℃之间，各酶在PH6080条件下放置1H能够维持60％以上酶活性，其中Y106EG、Z16EG和HEGV在PH90条件下放置1H可以维持60％以上酶活性。将六种耐碱性内切酶应用于麦草浆改性，发现Y106EG在酶用量仅为02IUG条件下，与对照相比，能够降低125％的打浆度，抗张强度指数，耐破指数，撕裂指数分别提升146％、143％和107％。对纸浆的改性效果明显优于其它五种耐碱性内切葡聚糖酶，显示出良好的潜在应用前景。2重组菌Y106OEEG粗酶液对不同纸浆改性时的酶处理条件优化及与其它酶的协同作用研究为提高耐碱性纤维素酶Y106EG的产量，利用基因工程方法，实现Y106EG基因的同源过表达，经实验室前期优化的发酵培养基发酵，所得发酵液的CMCASE酶活达到845IUML，是出发菌株的828倍。利用工程菌Y106OEEG粗酶液对杨木CMP（杨术化学机械浆），松木CMP（松木化学机械浆），麦草CP（麦草化学浆）进行改性研究发现，改性效果依次为麦草CP＞杨木CMP＞松木CMP。对酶法改性时的酶处理条件（处理温度、时间和PH等）进行了优化，发现当酶用量仅为02IUG浆，PH70，温度55℃条件下对麦草浆处理2H，与未用酶处理的对照相比，纸浆的抗张指数，耐破指数，撕裂指数分别增加了154％、169％和118％。研究了工程菌Y106OEEG粗酶液与其它酶的协同改性效果，发现Y106OEEG的内切纤维素酶与纤维素膨胀因子SWO4的联合处理，与单独使用内切酶或SWO4相比，反而降低了纸浆的强度和纤维素结晶度，而当与Β葡萄糖苷酶12IUG或木聚糖酶5IUG联合处理时，对纸浆的强度性质（抗张指数，撕裂指数，耐破指数）均有明显改善，在温度55℃、PH70条件下处理2H，当Y106OEEG粗酶液用量为02IUG，Β葡萄糖苷酶12IUG时，与对照相比，麦草浆的抗张指数、撕裂指数、耐破指数分别提升2368％、3410％、2082％。当木聚糖酶加量为5IUG时，与对照相比，麦草浆的抗张指数、撕裂指数、耐破指数分别提升3265％、4244％、2500％。此外，木聚糖酶与SWO4或木糖苷酶的联合处理，对麦草浆的改性也具有良好的协同作用效果。综合而言，Y106OEEG生产的内切纤维素酶与短小芽孢杆菌生产的木聚糖酶XYN30的协同处理对纸浆的改性效果最佳，为后续的共表达菌株构建提供了理论依据。3产耐碱性纤维素酶与木聚糖酶共表达菌株构建及产酶条件优化为实现耐碱性纤维素酶Y106EG及木聚糖酶XYN30在Y106WT中的共表达，采用顺反子共表达，融合酶表达，串联共表达三种方式，意在提高枯草芽孢杆菌Y106WT的产酶能力，结果表明，以串联共表达的方式能够实现两酶的共表达，对构建的共表达工程菌Y106OEEGXYL进行液体发酵，发现该菌株在培养56H后，CMCASE酶活可达最高820IUML，木聚糖酶在菌株培养64H时酶活达到最高6040IUML，分析该菌株产粗酶液的酶系发现，其滤纸酶活012IUML，外切纤维素酶活性002IUML，Β葡萄糖苷酶（未测到）均较低，说明对应用于纸浆改性而言，共表达菌所产纤维素酶的酶系比较合理，在对纸浆进行改性的同时不损害纸浆纤维。利用工程菌Y106OEEGXYL粗酶液在最佳处理PH70，最佳处理温度55℃，浆浓度10％WV条件下处理麦草化学浆2H，当酶用量为纤维素酶02IUG木聚糖酶活15IUG时，与对照及单独添加纤维素酶（02IUG）及木聚糖酶15IUG相比，纸浆白度和强度性能都有改善，其中与不加酶的对照浆处理相比，纸浆白度增加20％ISO，抗张指数、耐破指数、撕裂指数分别增加87％、166％和93％，而打浆度降低了15％。利用混料设计优化了工程菌Y106OEEGXYL发酵时培养基中的碳源及诱导剂比例，发现当麸皮，玉米芯，乳糖配比为333％、083％、083％时，液体发酵72H，纤维素酶活可达79IUML，木聚糖酶活可达745IUML，木聚糖酶活比优化前提升了141个酶活单位，且木聚糖酶与内切纤维素酶的比由原来的75提升至94。4纸浆的酶法改性机制研究通过对Y106OEEG粗酶液处理前后纤维质量变化，纤维结晶度XRD及红外光谱FITRATR等的变化分析发现，经重组菌Y106OEEG粗酶液处理后，杨木CMP和麦草CP的纤维质量得到明显改善，且改善效果好于松木CMP。Y106OEEG粗酶液处理后，杨木CMP及麦草化学浆的结晶度与对照相比明显提高，但松木CMP结晶度则提高不明显，三种浆经酶处理后纸浆中的氢键强度均有所提升。分别提取了麦草CP、松木CMP和杨木CMP中的木质素组分，研究了木质素对Y106OEEG的酶蛋白吸附特征，发现松木CMP和杨木CMP的木质素对纤维素酶蛋白的吸附能力明显高于麦草浆中的木质素，木质素对蛋白的不可逆吸附将影响酶对纤维底物的作用，因此相对而言，Y106OEEG酶液更适合用于麦草浆的改性。分别利用Y106OEEG和Y106OEXYL及共表达菌株Y106OEEGXYL的粗酶液（EG02IUG、XYLANASE15IUG、EG02IUGXYLANASE15IUG）处理纸浆，发现与对照或只添加EG或木聚糖酶的样品相比，共表达菌株的粗酶液处理后纸浆纤维的平均长度增加，宽度几乎不变，长宽比变大，细小纤维含量减少，卷曲指数及扭结指数均有所降低，且共表达菌株的粗酶液处理效果优于单独酶的处理效果。利用红外谱图对共表达菌株Y106OEEGXYL粗酶液处理前后草浆的吸收峰相对强度进行分析，发现经共表达菌株粗酶液处理后，氢键强度明显提升。利用SEM观察了重组菌Y106OEEG及共表达菌株Y106OEEGXYL的粗酶液处理前后草浆纤维表面形态变化，发现经两菌株的粗酶液处理后，与对照相比，纸浆中的细小纤维含量明显减少，纤维变得平整。酶处理后纸浆在纤维质量、纤维素结晶度、氢键强度、表面形态等方面发生的上述变化，是酶处理改善纸浆强度和滤水性能的内在原因。分别从酶的结构和性质、蛋白表面电荷、蛋白的疏水性、蛋白在纸浆纤维上的吸附等角度，探讨了Y106EG所产粗酶液与来源于特异腐质霉的三个耐碱性内切纤维素酶HEGI、HEGII和HEGV以及来源于其它芽孢杆菌的两个耐碱性内切纤维素酶Z16EG和A30EG对麦草浆的改性差异及内在原因。研究发现，与其它五种耐碱性内切纤维素酶相比，Y106EG由于酶蛋白对底物的亲和力相对较大，且在PH70时，PH值低于其自身等电点使其氨基酸易被带上正电荷，另外，蛋白表面的ZETA电位与其它几种耐碱性内切酶相比负值较小，且蛋白的疏水性小，这些都使得Y106EG酶蛋白更易于与带负电荷的细小纤维发生亲水性结合，从而有利于酶降解细小纤维。此外，Y106EG酶蛋白是典型的（ΒΑ8桶状结构特征，结构稳定性较好且开口宽阔的活性中心使其可以容纳更多类型不同的多糖支链，在催化降解复杂底物时有较大优势，该酶的CBM属于A型CBM，易于结合于结晶型纤维素多糖上。这些特征使得Y106EG在用于纸浆改性时表现出较好的优势。

简介：刺苦草VSPINULOSAYAN是水鳖科苦草属沉水草本植物，食用部分为其根状茎，刺苦草根状茎在贮藏、加工过程中极易产生褐变，严重影响感官品质，限制了对其大面积的开发利用。迄今为止，关于刺苦草根状茎的褐变研究国内外未见报道，为此，本研究对采后贮藏过程中部分褐变相关成分的变化、刺苦草根状茎主要褐变底物、多酚氧化酶PPO的纯化及其特性进行了研究。主要研究结论如下1经测定，刺苦草根状茎基本成分水分为7605％，可溶性蛋白质为26％，灰分为09％，还原糖为04％，淀粉为77％，脂肪为02％，VC为79MG100G。2刺苦草根状茎采后贮藏过程中，其褐变度、POD活性不断变大，VC含量逐渐降低，还原糖含量、总酚含量、PPO活性均是先变大后变小。褐变主要是由于酚类物质的氧化的结果，同时非酶因素对褐变的贡献也很大。3经薄层层析、紫外吸收光谱对其酚类物质及产物的定性鉴定，初步确定绿原酸是其褐变底物之一。4刺苦草根状茎PPO可用含3％PVP的005MOLLPH55的磷酸缓冲液匀浆法提取，经过30％～80％NH42SO4盐析、DEAESEPHADEXA50、SEPHADEXG75柱层析后，纯化倍数为1066倍，回收率为2125％。经过SDSPAGE电泳显示条带均一，相对分子量约为33KD。5对刺苦草根状茎PPO特性的研究表明，最适底物为邻苯二酚，KM00344MOLL，VMAX0094UMIN最适PH值为60，最适温度为50℃，热稳定性较好，抗坏血酸、NAHSO3、草酸、焦磷酸钠、柠檬酸、苹果酸、Β环状糊精能抑制PPO的酶活性。

简介：点击查看更多磷酸寡糖的设备及分离研究.pdf精彩内容。

简介：分类号UDC密级学号405604812103南昌大学硕士研究生学位论文同时检测禽畜可食组织中三类（9种）兽药膜免疫芯片的研发DEVELOPMENTOFSIMULTANEOUSDETERMINATIONF9KINDSOFVETERINARYDRUGSINANIMALFOODBYMEMBRANEBASEDDOTIMMUNOASSAY曹喜春培养单位（院、系）食品学院指导教师姓名、职称许杨教授申请学位的学科门类工学学科专业名称食品科学论文答辩日期2015529答辩委员会主席______________评阅人_______________年月日____________________________学位论文独创性声明____________________________一、学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作及取得的研宄成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研宄成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）签字日期年月日二、学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到中国学位论文全文数据库和中国优秀博硕士学位论文全文数据库中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）导师签名（手写）签字日期年月日签字日期年月日论文题目同时检测禽畜可食组织中三类（9种）兽药膜免疫芯片的研发姓名曹喜春学号405604812103论文级别博士口硕士口院系所食品学院专业食品科学联系电话18070494448EMAILQIANGUXUELIAN126COM通信地址邮编江西省南昌市青山湖区南京东路235号南昌大学（330047备注□公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，______年月后公开I

简介：硕士硕士学位论文学位论文孔石莼中体外抗氧化活性物质的研究STUDYONTHEANTIOXIDANTACTIVITYOFULVAPERTUSAEXTRACTS高波哈尔滨工业大学哈尔滨工业大学2013年6月CLASSIFIEDINDEXTS2012UDC577DISSERTATIONFTHEMASTERDEGREEINENGINEERINGSTUDYONTHEANTIOXIDANTACTIVITYOFULVAPERTUSAEXTRACTSCIDATEBOGAOSUPERVISPROFWEIHONGLUACADEMICDEGREEAPPLIEDFMASTEROFENGINEERINGSPECIALITYFOODSCIENCEENGINEERINGAFFILIATIONSCHOOLOFFOODSCIENCEENGINEERINGDATEOFDEFENCEJUNE2013DEGREECONFERRINGINSTITUTIONHARBININSTITUTEOFTECHNOLOGY

简介：酿酒酵母细胞PKA高活性与细胞热击抗性的研究ANINVESTIGATIONONTHEHIGHPKAACTIVITYANDHEATSHOCKRESISTANCEOFSACCHAROMYCESCEREVISIAE学科专业生物化学与分子生物学研究生赵刘指导教师马平生教授天津大学化工学院二零一零年六月一令一每牛六月中文摘要酿酒酵母细胞内存在两种与CA．IV口相关的信号通路，分别由异三聚体G蛋白和小G蛋白RAS介导。酿酒酵母的RAS．CAMP信号通路对酵母细胞的代谢、增殖、分化及胁迫抗性具有重要作用。RAS．C伽信号通路的下游直接靶标是CAMP依赖性的蛋白激酶A即PKA；当RAS蛋白活性过高时，PKA活性亦随之升高。PKA作为丝／苏氨酸激酶，可令其靶蛋白的丝氨酸或苏氨酸残基磷酸化。借助于磷酸化作用，PICA可调节细胞对外界营养条件和压力状况的应激反应过程。研究表明，酿酒酵母细胞PKA的活性可影响细胞的热击抗性；在PKA活性过高的情况下，酿酒酵母细胞的热击抗性较野生型明显降低。为进一步深入探讨PKA高活性与细胞热击抗性之间的关系，本研究从W303．1AYCP22RAS“A／归菌株出发，利用MTN．1ACZ／LEU2诱变文库随机插入其染色体的任意部位形成转座子。MTN文库转入W303．1AYCP22RAS2A眇菌株后，若转座子插入位点是抗性相关基因的ORF或顺式作用元件，则所形成突变株的热击抗性可能会有所改变。纯化所得转化子，检验其热击抗性，鉴别出六株热击抗性增强突变株；其中ZL7、ZL9和ZLL3热击耐受时间高达6RAIN，而ZLL0、ZLLL和ZLL6的热击耐受时问亦增至3MIN。再用过PRSQ2．URA3质粒回收鉴别转座子在染色体上的插入位点，确认发生突变的基因；其中ZL7突变株为NOP7和RAS2双失活菌株，ZL9突变株为ULP2失活菌株，ZLL0和ZLL6突变株均为NFSL失活菌株，ZLL1突变株为TPKL失活菌株，ZLL3突变株为TIM9失活菌株。最后通过构建YCP33ULP2、YCP33TIM9，并将之与现有的YCP33TPKL以及YCP33NOP7质粒分别转化至相应缺失菌株，形成回复突变株，后者恢复野生型菌株的热击抗性，说明ZL7、ZL9、ZLL1以及ZLL3等四菌株的突变位点确认无误。关键词酿酒酵母；PKA；热击抗性