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    • 简介:单位代码单位代码10635学号112013411002320硕士学位论文枳和资阳香橙等枳和资阳香橙等4种柑橘砧木的耐盐柑橘砧木的耐盐耐硼耐硼性差异及其生理研究差异及其生理研究论文作者论文作者杨惠栋杨惠栋指导教师指导教师彭良志彭良志研究员研究员学科专业学科专业果树学果树学研究方向研究方向果树生理生态与采后生理树生理生态与采后生理提交论文日期提交论文日期2017年5月15日论文答辩日期论文答辩日期2017年5月25日学位授予单位西南大学学位授予单位西南大学中国重庆2017年5月UNIVERSITYCODE10635STUDENTNUMBER112013411002320SOUTHWESTUNIVERSITYMASTERDISSERTATIONSTUDYONSALTANDBORONTOLERANCEANDITSPHYSIOLOGICALRESPONSEOFFOURCITRUSROOTSTOCKSCANDIDATEHUIDONGYANGADVISERPROFLIANGZHIPENGSPECIALITYPOMOLOGYDIRECTIONPHYSIOLOGYECOLOGYANDPOSTHARVESTQUALITYCHONGQINGPRCHINA201705
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    • 简介:山东农业大学硕士学位论文光质对叶用莴苣生理特性及品质的影响姓名许莉申请学位级别硕士专业蔬菜学指导教师刘世琦20070615关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体,均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定,同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名坳导师签名鸿易日期之璺‘7/7/
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      ( 4 星级)
    • 简介:华中农业大学硕士学位论文一种来自植物内生芽胞杆菌的新型抗魔芋软腐病菌蛋白姓名周盈申请学位级别硕士专业生物化学与分子生物学指导教师孙明20060601一种来自植物内生芽胞杆菌的新型抗魔芋软腐炳菌蛋J次转化,分别从300个花魔芋愈伤组织中得到了16个和184“具有潮霉素抗性的愈伤组织,其抗性愈伤率为5.33%和6.00%。获得的抗性愈伤组织进一步在分化培养基上进行分化,其分化效率为31.2%和22.2%。移栽后,分别得到了39株和36株成活植株。PCR检测结果表明分别有26株和21株再生花魔芋出现了高丝氨酸内酯酶基因的特异性扩增带型,其阳性率分别为66.7%和58.3%。随机挑取20个PCRJFT性植株的DNA进行斑点杂交检测,结果表明高丝氨酸内酯酶基因已经整合入花魔芋基因组。关键词软腐病;拮抗内生菌;抗菌蛋白基因克隆;农杆菌;魔芋遗传转化2
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    • 简介:分类号UDC密级单位代码湖南农业大学博士学位论文10537盾叶薯蓣类原球茎的发育及其相关基因差异表达的研究STUDYONTHEDEVEIOPMENTOFPLBANDRELATEDDIFFERENTIAIDISPIAYOFMRNAINO/OSCOREAZINGIBERENS/SCHWRIGHT研究生姓名蒸睦墓指导教师围&垡熬攫学科专业植堑堂研究方向童近撞塑堂提交论文时问2QQ』1212论文答辩LI期2Q堕1213答辩委员会主席婴滏屋垫援沦文评阅人甚鸿数攫学位授予13期匮皂翌煎援姜耋盛塑援睦龙清麴攫趟壹握塾援巾国长沙00五年十一月化,植株的抗逆境能力加强。顶芽初生分生组织周围的初生增厚分生组织平周分裂产生薄壁组织细胞是盾叶薯蓣类原球茎膨大的主要因素,它在基本组织中转化为木栓形成层,细胞分裂形成周皮。顶芽下方的原形成层束,分化为维管组织,电镜图中原形成层束各细胞器的变化表明了导管分子的细胞程序性死亡。类原球茎不定根的发生为内起源。不定根内细胞分化形成维管束,与基本组织的维管束相连,类原球茎成为一个整体。愈伤组织上丛生芽、不定根的发生分别为外起源和内起源,二者维管组织基部不相连接。这可以作为揭示盾叶薯蓣类原球茎移栽适应性强,而试管苗移栽不易成活的主要原因之一。盾叶薯蓣愈伤组织、类原球茎、叶腋基部膨大球体等各繁殖体的组织化学比较研究结果表明,各繁殖体都有薯蓣皂昔较浅的显色反应。3抗氧化酶AOES及可溶性蛋白等生化指标随类原球茎的发生发育呈有规律的变化。可溶性蛋白含量和抗氧化酶活性与类原球茎的发生及发育密切相关。可溶性蛋自在第Ⅱ期胚性细胞起动期含量较高,随着类原球茎的膨大和发育逐渐减少,但在第V期又有显著回升。超氧化物歧化酶SOD、过氧化物酶POD及淀粉酶AMY活性的变化趋势与可溶性蛋白相似。而过氧化氨酶CAT的活性变化趋势相反。POD和AMY同工酶酶谱在类原球茎发育各时期具有其特征谱带,可作为类原球茎形态建成不同阶段的生化指标。POD同工酶谱带PL为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ时期的特异谱带。P5、P6和P7出现在第V期,为特异表达谱带。AMY同工酶特异谱带A2和A3出现在第1I期,为类原球茎发生的的特异谱带;如在第V期强烈表达,而丸表达在第V期关闭。蛋白质双向凝胶电泳结果照示,类原球茎发生不同时期样品的蛋白表达数量和丰度都有较大的差异。第1I期出现了大量特异蛋白斑点和表达增强的蛋白,同时也有停止表达和表达减弱的蛋白。其中第1期表达的特异蛋自有5个,他们与非胚性愈伤组织的分裂和生长相关。第1I期特异表达的蛋白有43个,等电点主要集中在PH55~75,相对分子量在27~60KD之间。4内源激素与多胺水平的变化及其相互平衡在盾叶薯蓣类原球茎的发生和形态建成中起着重要的调控作用。
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      上传时间:2023-03-20
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    • 简介:山东农业大学硕士学位论文光质对菠菜生理特性及其品质的影响姓名齐连东申请学位级别硕士专业蔬菜学指导教师刘世琦20070616关于学位论文原创性和使用授权的声明本人所呈交的学位论文,是在导师指导下,独立进行科学研究所取得的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体,均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定,同意学校保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。保密论文在解密后应遵守此规定。论文作者签名导师签名日期
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      上传时间:2023-03-19
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    • 简介:STUDIESONMORPHOGENESISANDSTRUCTUREOFTHERHIZOME0FDIOSCOREANIPPONICAANDTHEHISTOCHEMISTRYOFTHEDIOSGENINTHQ“SUBMITTEDTOESLSSUMLTTEATOQINGDAOAGRICULTURALUNIVERSITYINFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTFORTHEDEGREEOFMASTEROFSCIENCELILINGHAIDEPARTMENTOFBOTONYSUPERVISORCAOYUFANGQMGDAO‘CHINAJUNE2010青岛农业大学硕十论文目录211彳|蜡切片法13212离析制片法J1322植物组织化学方法13研究结果1穿龙薯蓣根状苇的发育解剖学研究J1411根状茎的成熟结构1412根状茎的初生结构及其形成过程14121根状茎顶端结构14122根状茎初生结构的分化1413内含物的积累1514根状茎结构的离析观察162穿龙薯蓣根状茎的结构和薯蓣皂苷积累的相关性研究。1721薯蓣皂苷在根状茎顶端的积累和分布1722薯蓣皂苷在根状茎中的积累和分布173穿龙薯蓣实生苗根状茎的形态发生及其薯蓣皂苷积累的研究1831穿龙薯蓣胚的结构1832胚芽的分化及实生苗根状茎的形成1833根状茎初生结构的形成1934实生苗根状茎中薯蓣皂苷的积累20讨论1穿龙薯蓣根状茎的形态学本质212关于穿龙薯蓣根状茎的形态发生213穿龙薯蓣根状茎的生长增粗机制224根状茎发育和薯蓣皂苷积累的关系J225导管分子变化与演化趋势23结论24
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    • 简介:上海交通大学博士后学位论文番茄耐低磷与耐盐性的研究姓名万延慧申请学位级别博士后专业生物学指导教师陈火英朱为民20090901博I后T作报告番茄耐低膦,。J耐盐忡的ILJF究SNP的效果最好,从而增强植株的耐盐性。5、在100MMOLL。NACI胁迫下,研究了外源NO供体硝普钠SNP处理对2个酬‘铺性刁IL刊的番茄基I剑型幼苗根、茎和叶离子吸收和分柿的影响。结果表明,外源NO娃著降低盐胁迫下番茄幼苗根、茎和叶中NA、CI’含量,促进K、CA2和M92含量并提高K/NA、CA2/NA和M92/NA值,促进根对K、CA2的选择性吸收SUN。、SC,N。和K、CA2十向地上部的选择性运输SR。N。、S附N。。SNP单独处理时对以上各指标没有显著影响。在梢例的处甥条件下,龄敏感品种的NA、CL。在根、茎和叶中累积量均低于耐盐品种,而K、CA“和M92的累积则相反;根向介质吸收SWN。、SC“N。,向茎、叶运输的SWN。、S例N。值均较低。以上结果表明,外源NO能通过降低离子毒害,改善植株体内的养分平衡,缓解NACI胁迫对番茄幼苗造成的伤害,增强番茄幼苗的酬‘盐能力。6、滴灌在重熊碱地改良中效果显著,在滴灌情况下番茄能够讵常生长座果。
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      上传时间:2023-03-19
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    • 简介:性别分化是植物发育的基本过程,控制植物的性别表达具有重要意义,黄瓜CUCUMISSATIVUSL具有非常丰富的性别表现类型。是研究植物性别表达的模式植物,目前已经明确控制黄瓜性别表达的基因位点有F、M、A、INF、GY、M2、TR。除遗传因素外,黄瓜性别表达还受环境和激素的调控,长日照、高温、赤霉素促进雄花产生,而短日照、低温、乙烯则促进雌花形成。激素在黄瓜的性别表达中起重要作用。黄瓜性别表达的乙烯控制模型认为乙烯既促进雌蕊发育,又抑制雄蕊发育。该模型推断,F基因的产物控制乙烯在黄瓜植株分布的部位和浓度,促进雌性的表达;而M基因的产物则控制乙烯信号的识别,在乙烯浓度高于阈值时抑制雄蕊的发育。近年来的研究发现对该模型提供了实验支持F基因已被克隆,为乙烯合成酶基因家族成员之一,符合其控制乙烯浓度功能的预测;M位点直接介导了乙烯诱导的雄蕊滞育。要进一步验证该模型的真实性,必须要克隆M基因,而与M基因紧密连锁分子标记的获得是分子标记辅助选择乃至于克降M基因的前提。此外,鉴于强雌株在黄瓜生产中的重要性,研究控制强雌性状的基因在理论和生产实践上均具有重要意义。本研究通过黄瓜性别决定基因M的遗传定位及强雌基因QTL群体的遗传分析与定位,初步揭示黄瓜性别决定的基因组成和遗传特性,为进一步克隆相关基因和阐明黄瓜性别决定机制奠定基础。主要结果如下1以近等基因系WI1983G雌性株,基因型为MMFF和WI1983H两性花株,基因型为MMFF及其F1和BC1为材料,它们的杂交组合F1代群体单株均开单性雌花性型表现为雌性株,雌性花对两性花为显性性状。BC1代群体751个单株当中,雌性株373株,两性株378株,符合11的分离比X2003P005,表明雌性花对两性花为显性,由一对核基因控制。2通过2112对SSR引物和1对SCAR引物的筛选与分析,共获得了与黄瓜性别决定基因M紧密连锁的三个共显性标记SSR19914、SCAR123和SSR23487。其中,SSR19914与SCAR123位于M基因的同侧,与M基因的遗传距离分别为32CM和094CM,SSR23487位于M基因的另一侧,与M基因的遗传距离为028CM,最终将M基因定位在122CM的遗传区间内。3以雌雄同株型的强雌株S298和普通雌雄同株95为材料杂交得到F1,F1自交得到192株F2分离群体,与亲本95回交得到188株BC1分离群体,经性状调查及雌花节率统计,BC1与F2分离群体的雌花节率均呈连续分布,并且有超亲分离,表明该强雌性状由多对核基因所控制。4利用2112对SSR引物,采用混合群体分离分析法BULKEDSEGREGANTANALYSIS,BSA分析亲本S298、95和BC1、F2分离群体,结合黄瓜高密度遗传图谱和BC1、F2的雌花节率,经JOINMAP30、MAPQTL40软件分析,共检测到了3个控制黄瓜强雌性状的QTLSMODF1A、MODF1B和MODF1C。MODF1A位于第三号染色体,其遗传贡献率为498~546%MODF1B与MODF1C位于第六号染色体,其遗传贡献率分别为63~72%和42~91%,该QTLS的总遗传贡献率为512~629%。MODF1A与MODF1B的加性效应为正值,说明增效等位基因来自高值亲本S298;MODF1C的加性效应为负值,说明增效等位基因来自低值亲本95。
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      上传时间:2023-03-20
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    • 简介:分类号Q78密级单位代码10389学号1081630福建农林大学硕士学位论文辣椒CABZIPI转录因子的功能分析学科门类一级学科名称二级学科名称研究方向研究生指导教师理学生物学生物化学与分子生物学植物化学与生物技术邱敏何水林教授完成时间二0一一年四月DISSERTATIONFORMASTERDEGREEOFFUJIANAGRICULTUREANDFORESTRYUNIVERSITYFUNCTIONALIDENTIFICATIONOFCABZIPL,ABZIPTRANSRIPTIONFACTOROFCAPSICUMANNUUMSUBJECTCATEGORYSCIENCEDISCIPLINEBIOLOGYSPECIALTYBIOCHEMISTRYANDMOLECULARBIOLOGYRESEARCHFIELDPLANTCHEMISTRYANDBIOTECHNOLOGYCANDIDATEMINQIUSUPERVISORPROF.HESHUILINSUBMITTEDTIMEAPRIL,2011
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      上传时间:2023-03-20
      页数: 70
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    • 简介:山东农业大学硕士学位论文苹果MDCIPK6的基因克隆及其在逆境胁迫响应中的作用姓名王荣凯申请学位级别硕士专业果树学指导教师郝玉金20110515苹果MDCIPK6的基因克隆及其在逆境胁迫响应中的作用2关键词关键词苹果;MDCIPK6;拟南芥;SOS途径;非生物逆境胁迫;番茄
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      上传时间:2023-03-19
      页数: 77
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    • 简介:河北农业大学硕士学位论文赤霉素GA3对高山杜鹃粉金蝶开花的影响姓名樊雨申请学位级别硕士专业园林植物与观赏园艺指导教师肖建忠20090529THEEFFECTSOFGA3ONFLOWERINGOFRHODODENDRONDELAVAYIMASTERCIDATEFANYUSPECIALTYLSCAPEPLANTNAMENTALHTICULTURETUTPROFXIAOJIANZHONGABSTRACTRHODODENDRONDELAVAYIISONEGREATKINDOFTHEABUNDANTRESOURCEOFCUCKOOITHAVESKYHIGHVALUATIONOFVIEWECONOMYINTHISSTUDYTHEFLOWERINGOFTHEALPINEAZALEASTUDIEDTHEIMPACTOFFLOWERINGONTHELEAVESOFTHERELEVANTINDICATSOFENDOGENOUSHMONECONTENTACTIVITYINDICATOFGANICCONTENTWERECOMPAREDANALYZEDTHEIMPACTOFTRYINGTOFINDALPINEAZALEAPINKFLOWERINGKINGDEEFACTSTRYTOTHEUSEOFGIBBERELLICACIDONFLOWERINGALPINEAZALEAREGULATEDREVEALADIFFERENTCONCENTRATIONOFGIBBERELLINKINGDEEPINKAZALEAALPINEDIFFERENTEFFECTRELATIONSHIPTHEMAINFINDINGSAREASFOLLOWS1GIBBERELLINHASCHANGEDINTHEALPINEAZALEARHODODENDRONDELAVAYI‘COSMOPOLITAN’CHANGESINENDOGENOUSHMONESLOWCONCENTRATIONOFGA3TREATMENTALPINEAZALEALEAVESRHODODENDRONDELAVAYI‘COSMOPOLITAN’ZEATINRIBOSIDEZRCONTENTINTHETIMEVALUESIGNIFICANTLYDELAYEDTHEHIGHCONCENTRATIONOFD500MGLE1000MGLTHEREISNOTMUCHPROCESSINGTIMECHANGESZRSIGNIFICANTLYINCREASESTHEMAXIMUMGA3TREATMENTALPINEAZALEALEAVESRHODODENDRONDELAVAYI‘COSMOPOLITAN’ABAABACONTENTBUTALSOTHETIMINGOFTHEMAXIMUMTHERETHEEXPERIMENTSSHOWTHATBTODEALWITH100MGLTOPROMOTETHEBESTFLOWERING2GIBBERELLINSODACTIVITYWASGRADUALLYDECLININGTRENDINBTODEALWITH100MGLISMOSTOBVIOUSWHENLOWERDEIONOFRHODODENDRONDELAVAYIGA3TERMADVANCEINLIEUOFLOWTEMPERATUREPHASEOFTHEROLEOFVERNALIZATIONRHODODENDRONDELAVAYI‘COSMOPOLITAN’TRYTODEALWITHMATERIALINTHEPODACTIVITYOFSMALLERAMPLITUDEWITHTHEINCREASEINGA3CONCENTRATIONINCREASEDPODACTIVITYWHENGA3CONCENTRATIONOF100MGLWHENPODACTIVITYDECREASEDITWITHTHEINCREASEINPROCESSINGTIMEGA3PALACTIVITYWASAGRADUALUPWARDTRENDINTHETREATMENTOFPALACTIVITYINCONTROLCKISNOTVERYDIFFERENTPLUSMINUSINTHECK3WHENTHEGA3CONCENTRATIONOF100MGLATTHEMAXIMUMSOLUBLEPROTEINCONTENTWITHSUBSEQUENTINCREASEINGA3CONCENTRATIONDECREASEDSOLUBLEPROTEINCONTENTINTHE1000MGLBUTDIDNOTREBOUNDWHENGA3CONCENTRATIONOFMETHAN100MGLWHENTHESOLUBLEPROTEINCONTENTSOLUBLESUGARCONTENTINTHEOCTOBER28TOREDUCEINTHENOVEMBER2NOVEMBER9WHENTHEPICKUPINLATENOVEMBER18WHENTHESOLUBLESUGARCONTENTDECREASEDNOVEMBER29PICKUPINSOLUBLESUGARCONTENT
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      上传时间:2023-03-21
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    • 简介:河北农业大学硕士学位论文梨休眠期芽内营养变化及呼吸代谢研究姓名张双申请学位级别硕士专业果树学指导教师张玉星20090610STUDYONNOURISHMENTCHANGESRESPIRATYMETABOLISMOFDMANCYPEARBUDSAUTHZHANGSHUANGMAJPOMOLOGYSUPERVISZHANGYUXINGABSTRACTTHEPHYSIOLOGICALBIOCHEMICALMETABOLISMSDIDNOTSTOPAFTERTHEDECIDUOUSFRUITTREESINTODMANCYTHISEXPERIMENTWASCARRIEDOUTDURING20072008INAGRICULTURALUNIVERSITYOFHEBEITHERELATIONSOFRESPIRATYMETABOLISMDMANCYWERESTUDIEDINYAPEARTHEMAINRESULTSWEREASFOLLOWS1THECONTENTSOFSOLUBLESUGARFIRSTRAISEDLATERPEDTHENRAISEDTHESOLUBLESUGAROFBUDSREACHEDTHETOPCONTENTSINTHEDLEOFJANUARYTHECONTENTSOFSTARCHFIRSTPEDTHENRAISEDTHETRENDENCYSHOWEDINVERSERELATIONSHIPWITHTHATOFTHESOLUBESUGARTHEMINIMUMCONTENTOFBUDSAPPEAREDINTHEDLEOFJANUARYGA3SARAISEDCARBOHYDRATECONTENTHIGHEROFCONCENTRATIONOFGROWTHREGULATSWASBETTEREFFECTSOFITHAD2THECHANGESTENDENCYOFPROTEINCONTENTSOFBUDSHOWEDFIRSTPEDTHENRAISEDTHENPEDAGAINENDINGBEFEGERMINATIONTHEMAXIMUMCONTENTSWEREINTHEDLEOFJANUARYTHECHANGESTENDENCYOFAMINOACIDCONTENTSOFBUDSHOWEDTHETENDENCYENDFIRSTDECREASEDLATERENDLASTTHEMAXIMUMCONTENTSWEREINTHELASTOFJANUARYGA3SADECREASEDTHECONTENTOFPROTEINHIGHERCONCENTRATIONSOFREGULATSWEREMEEVIDENTEFFECTSWEREGA3SAINCREASEDTHECONTENTSOFAMINOACID3DURINGDMANCYPERIODPGIACTIVITYPEDSDHACTIVITYCHANGEDLITTLEDURINGDMANCYPERIODG6PDH6PGDHACTIVITIESENHANCEDEFFECTSOFGA3SAONTHEMWEREREVERSETHEHIGHEROFREGULATSCONCENTRATIONTHEBETTEREFFECTTHEYHADTHATCHANGESOFENZYMESWERECONSISTENTWITHRESPIRATYPATHWAYOFREGULATSINDICATEDTHATGA3SAWEREHELPFULTODMANCYRELEASEBYENHANCINGACTIVITIESOFG6PDH6PGDH4RESPIRATYINTENSITYWASHIGHDURINGEARLYPERIODWHILETHETEMPERATUREWASHIGHINCLIMATETHENDECREASEDWASVERYSTABLEONALOWERMETABOLICLEVELFALONGTIMEONLYINCREASEDSLIGHTLYAFTERTHEENDOFDMANCYASTEMPERATUREINCREASESTHERESPIRATYINTENSITYHADASHARPRAISEDIFFERENTKINDSOFRESPIRATYPATHWAYCHANGEDOBVIOUSLYTHERATEOFTCAWASSTABLETOOKADOMINANTPOSITIONTHERATEOFEMPTOOKAPINGTRENDBUTTHATOFPPPHADAOBVIOUSLYRISINGTRENDSPRAYINGGA3SARAISEDRESPIRATYINTENSITYRAISEDRATESOFTCAPPPBUTTHATOFEMPHIGHERCONCENTRATIONSOFREGULATSWEREMEEVIDENTEFFECTSWERETHEEMPRATE
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      上传时间:2023-03-20
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      上传时间:2023-03-19
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    • 简介:浙江大学农业与生物技术学院硕士学位论文高温强光下番茄叶片叶黄素类物质与抗氧化系统的交叉协同光保护作用姓名于海静申请学位级别硕士专业蔬菜学指导教师周艳虹20100101堑丝厶堂鲤堂丝迨塞基量塑堂委荭L2II萎丞羞物压皇速氢丝丕统的塞幺协园堂堡塑往盥NPQ的补偿保护机制。关键词高温强光胁迫,非光化学猝灭NPQ,抗氧化系统,抗坏血酸,活性氧,叶绿素荧光,光合作用,叶黄素,突变,LYCOPERSICONESCULENTUMMILLIII
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      上传时间:2023-03-20
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    • 简介:本论文的主要研究内容包括两个方面1通过农杆菌转化法将拟南芥NAH逆向转运蛋白基因ATNHX1导入猕猴桃基因组PCR初步筛选得到假定转基因植株并经过分子生物学检测和生理功能的验证。2通过NOTHERN杂交的方法验证不同环境影响因子下AT4G12490的反应特征以确定该基因在逆境下的功能。1农杆菌介导的猕猴桃转化及ATNHX1转化植株抗盐性分析猕猴桃起源于中国因风味独特、营养价值高、富含多种有益健康成分和潜在的药用前景而倍受关注。作为一种新型商业化水果猕猴桃在水果市场中影响小但重要性日益增长。近年来随着生活水平的提高和消费结构的变化人们对优质猕猴桃的需求越来越大。我国丰富的猕猴桃种质资源是新品种选育的基础但猕猴桃属植物雌雄异株遗传背景复杂传统育种方法存在周期长、效率低等问题。现代生物技术的兴起为猕猴桃育种开辟了一条新的途径。随着猕猴桃组织培养的发展通过遗传转化方法导入目的基因已成为猕猴桃育种的重要手段。本实验选用全国栽种面积最大、产量最高的美味猕猴桃作为研究对象在猕猴桃的高频再生体系的基础上采用农杆菌转化法将拟南芥ATNHX1基因转入猕猴桃并对转化植株做了分子生物学鉴定及生理学检测。具体工作如下农杆菌介导的猕猴桃遗传转化。用携带PHZX1质粒的农杆菌菌株LBA4404侵染猕猴桃愈伤组织、茎切段和叶切片在附加600MGL水解酪蛋白、20MGL卡那霉和500MGL头孢霉素的MS培养基上诱导愈伤组织和植株再生。含10MGLIBA的MS培养基用来生根。猕猴桃遗传转化体系的优化。探讨不同外植体类型、预培养、农杆菌侵染时间、共培养时间、农杆菌浓度及乙酰丁香酮对猕猴桃转化的影响。猕猴桃茎比叶更适于农杆菌转化。叶片预培养12天的转化频率会显著增加而预培养不会提高茎的转化率预培养4天后转化率反而会下降。农杆菌侵染、浓度时间及共培养时间对转化的影响很关键。叶片的合适侵染时间是2分钟茎段为15分钟。2天共培养时间对茎及叶片都是合适的。适宜农杆菌浓度能明显促进侵染同时减少其对外植体的伤害。相比茎最佳OD60006叶片需要低浓度菌液最佳OD60002。猕猴桃转化体的分子生物学检测。从4株PCR阳性植株均扩增得到560BPATNHX1基因片段其中3个株系被用来做SOUTHERN杂交分析。TL1与TL2含单拷贝ATNHX1然而TL3有2拷贝。在TL1与TL2中反转录PCR结果表明该基因在转录水平上表达。猕猴桃转化体的生理学检测。对两个转基因株系TL1与TL2进行了生理分析以评价其抗盐性。一般条件下NA、K含量在转基因植株及对照中相同;在高盐条件200MMOL1下转基因植株中NA、K含量明显高于对照。植物在逆境下会产生大量的游离脯氨酸进行渗透调节往往发生膜脂过氧化作用丙二醛MDA是膜脂过氧化的最终分解产物。经盐胁迫3天后转基因株系自由脯氨酸含量高于对照;转基因株系中丙二醛含量均低于对照。这些数据证明NAH反向转运蛋白在抗盐胁迫中的作用ATNHX1基因的表达与缓解NA毒害作用是相关联的。盐胁迫条件下转基因植株营养生长明显改善。转基因株系TL1TL2及对照转入土壤中生长2周用含0200MMOLLNACL溶液浇灌20天可观察到明显的抑制效果;野生型植株叶片逐渐变黄、萎蔫然而转基因植株仍然保持绿色且生长正常。盐胁迫条件下转基因株系比对照在营养生长阶段生长量有明显的提高。150MMOLLNACL处理转基因株系及对照20天对照芽鲜重为未处理31%转基因株系TL1为未处理77%后者比前者比对照高2倍多。黄酮是猕猴桃中重要的营养成分是植物的次生代谢产物参与阻止细胞老化拮抗ROS。不同猕猴桃组织中黄酮含量不同大体上有以下规律叶片>茎>根。在盐胁迫处理后转基因株系黄酮含量高于对照TL1和TL2分别比对照高71%、40%叶片黄酮含量分别比对照高68%、44%这就进一步确定转基因株系有较强的抗氧化能力这些结果与MDA含量变化相吻合。2AT4G12490对逆境的抗性功能研究植物不断受到环境中各种信号的冲击其中部分会造成胁迫影响植物的生长及发育。在应对这些不良逆境过程中进化出许多策略增加对胁迫条件的耐受性和适应性例如改变基因表达特征导至整个细胞或系统水平的适应应答。多个报道表明HYPRP基因表达受多种胁迫因素的诱导但是这些研究仅限于单个或少数基因。拟南芥的AT4G12490是拟南芥EARLI1亚家族HYPRP基因家族中的一员。在本工作中我们以AT4G12490的功能作为研究目标。AT4G12490可被多种胁迫因素诱导。4℃处理拟南芥2H后AT4G12490的MRNA水平缓慢增加16HMRNA累积到最强。种子苗4℃处理24H然后置于25℃室温下611后AT4G12490的MRNA降至较低水平24H后恢复至基态水平。16H冷处理能最大强度激活AT4G12490的表达但恢复至常温后这种稳态并不能长久保持。没有冷诱导的条件下长日照种子苗中AT4G12490MRNA基本水平略高于短日照种子苗。可能该基因是光依赖的并且冷激活该基因也需要光的辅助。盐胁迫是影响植物生长的重要因素之一发现盐可诱导AT4G12490表达。拟南芥受到胁迫三天之内盐胁迫缓慢的激活AT4G1249024H该基因表达水平明显升高72H达到最大。干旱胁迫下随胁迫时间的延长AT4G12490MRNA水平逐渐增高。处理12H后RNA累积达最高点这表明AT4G12490可被干旱胁迫激活。水杨酸胁迫可诱导AT4G12490。水杨酸SA是一种重要的信号分子与植物抗病性有关应答不同病原体侵袭;另外水杨酸也参与调节植物对各种氧化胁迫的反应。在24H内AT4G12490的RNA表达水平在处理016H后增加缓慢而且RNA的积累的量处于很低的水平上24H达到峰值。这些结果证明SA作为一种防御信号能激活AT4G12490RNA的表达证明AT4G12490参与植物病原体防御及胁迫耐受性。AT4G12490过表达增加拟南芥在盐及干旱胁迫下根的生长。利用AT4G12490过表达植株研究该基因对拟南芥生理的影响发现在盐及干旱胁迫下过表达植株萌发率低于CO10而根长伸长高于CO10。这些结果表明过表达植株具有一定程度的抗旱和抗盐能力然而CO10种子萌发率超过过表达植株这可能要归因于过表达该基因引起的负面效应。
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      上传时间:2023-03-21
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