简介：石河子大学硕士学位论文绵羊MBL基因多态性与支原体性肺炎相关性研究姓名徐燕辉申请学位级别硕士专业动物遗传育种与繁殖指导教师赵宗胜20070501绵羊MBL基因多态性与支愿体性肺炎相关性研究ABSTRACT1THECLONINGANDSEQUENCINGANALYSISOFSHEEPMBLINTHESTUDYPCRTECHNIQUEWASAPPLIEDTOAMPLIFYTHESHEEPMBLINWHICHTHEDNAWASEXTRACTEDFROMBLOODOFPOLLDORSETSHEEPTHETARGETFRAGMENTWASEXTRACTEDANDPURIFIEDBYUSINGTHEPURIFICATIONKITTHENCLONEDINTOPBSTVECTORCONSEQUENTLYTHERECOMBINANTPLASMIDWASAMPLIFIEDANDEXTRACTEDFROMTHETRAILSFOTRUANTANDTESTEDTHEINSERTINGOFDNAFRAGMENTTHERESULTSWEREASFOLLOWS1THEFRAGMENTWAS549BP，INCLUDINGEXONL47BP、EXON2T07BPANDINTRONL395BP，THEEXONLAND2CODED5TAMINOACIDSINWHICHTHEREWERE16G／YXYREPEAT，FOLLOWINGTHESIXTHGLYXYWERELEUCINEANDARGININE‘2THENUCLEOTIDESEQUENCESAMONGDIFFERENTSPECIESWEREQUITECONSERVATIVETHEHOMOLOGIESOFTHEMBLGENEBETWEENTHEPOLLDORSETANDCATTLE、HUMAN，RHESUS，PIG，HORSE，MOUSE，RATMBLANDCATTLEMBLAWERE968％、857％、857％、844％、831％、812％、812％、805％THERESULTSHOWEDTHEPOLLDORSETSHEEPMBLWASCLOSEDTOTHECATTLEMBLCANDITMAYBESHEEPMBLCGENOTYPECOMPARINGTHEIRAMINOACIDSENCODEDBYDIFFERENTSPECIESMBLGENE，GEKGEPWERECOMMONAMINOACIDS，WHICHINDICATEDTHAT“GEKGEP”AMINOACIDSSEQUENCESAMONGDIFFERENTSPECIESWEREQUITECONSERVATIVE2RELATIONSHIPBETWEENTHEPOLYMORPHISMSOFSHEEPMBLGENEANDMYCOPLASMAPNEUMONLAEASAKEYANTIINFECTIONMOLECULEINTHEFIRSTLINEOFHAMANINNATEIMMUNITYANUMBEROFSTUDIESHAVESUGGESTEDTHATMBLHAVEASSOCIATEDWITHMUCHDISEASES，SUCHASIMMUNODEFICIENCY，SPECIFICINFECTION，CYSTICFIBMSISSYSTERNICLUPUSERYTHEMATOSUS，RHEUMATOIDARTHRITISETA1SHEEPMYCOPLASMAIPNEUMONIAISASPECIFICINFECTEDDISEASECAUSEDBYMYCOPLASMAOVIPNEUMONIAETHISSTUDYWASDESIGNEDTOINVESTIGATETHEPOLYMORPHISMSOFSHEEPMBLANDITSRELATIONSHIPWITHMYCOPLASMAOVIPNEUMONIAEOF155SHEEPINPOLLDORSET、TEXEL、SUFFOLKSHEEPANDHUSHEEPBYPCRRFLPWITHALULANDBSSTLIATTHESAMETIMETESTEDTHEINFECTINGPERCENTAGEOFMYCOPLASMAOVIPNEAMONIAEINTHESESHEEPBYMEANSOFINDIRECTAGGLUTINATIONREACTIONALLTHESEDATAWEREANALYZEDBYDPSSOFTWARETHEALLRESULTSWEREASFOLLOWSF1FOURGENOTYPEAA、BB、AB、ACHADBEENDISCOVEREDBYPCRRFLPDIGESTEDWITHALUIINTHEFOURBREEDSSHEEP，ALLTHESEGENOTYPESWERECONTROLLEDBYA、B、CALLELEGENEAMONGTHESEGENOTYPESANDALLELEGENES，AAWASTHEADVANTAGEGENOTYPEANDAWASTHEADVANTAGEALLELEGENE2INTHEPCRRFLPSITEOFALUI，STATISTICALRESULTSOFFTESTINDICATEDTHATTHEPOLYMORPHISMINPOLLDORSETANDHUSHEEPDIDNOTFITWITHHARDYWEINBERGEQUILIBRIUMBUTTEXELANDSU行BLKSHEEPDIDRHEPOLYMORPHISMINFORMATIONCONTENTSPICINHUSHEEPPOPULATIONWASTHEHIGHEST，FOLLOWEDBYTHEPOLLDORSETSHEEPPOPULATIONINTEXELSHEEPANDSUFFOLKSHEEPPOPULATIONTHEPICWERELIGHTPOLYMORPHIC3THERESULTSOFTHESESHEEPINFECTINGMYCOPLASMAOVIPNEUMONIAEWERETHEINFECTINGPERCENTAGEINHUSHEEPWASTHEHIGHEST，SUFFOLKWASTHELOWEST，ANDTHEINFECTINGPERCENTAGEOFHUSHEEPPOPULATIONWASSIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHATOFPOLLDORSETANDSUFFOLKSHEEP，BUTNOTSIGNIFICANTLYHIGHERTHANTHATOFTEXELSHEEPAMONGTEXEL、POLLDORSETANDSUFFOLKSHEEPPOPULATION，THEIRINFECTINGPERCENTAGEWERENOTSIGNIFICANT4INTHEPCRRFLPSITEOFALUL，THEEFFECTOFPOIYMORPHISMOFSHEEPMBLGENEONINFECTINGMYCOPLASMAOVIPNEUMONIAEWASANALYZED，THERESULTSSHOWEDTHATTHEINFECTINGPROBABILITYINSHEEPWITHGEUOTYPEAAWERELOWESTSIGNIFICANTLYTHANTHATAB、ACGENOTYPEINAWORDTHEGENOTYPEAAPLAYSANIMPORTANTROLEINADAPTABILITYONSHEEPMAYBEITCOULDBEOSEDASAMARKERINMOLECULARBREEDINGOFSHEEPINTHEFUTURE5INTHEPCRRFLPSITEOFBSSTLI，THEREWEL。EONLYONEGENOTYPE274BP250BP25BPINFOURBREEDSSHEEP，WHICHINDICATEDTHATTHEREWASNOPOLYMORPHISMSINTHISLOCUSKEYWORDSSHEEP，MBLCLONING，MYCOPLASMALPNEUMONIAGENEPOLYMORPHISMSTYPEOFPAPERATHEORYRESEARCH

简介：四川农业大学颂I二。瞥位论义长毛免微卫星标记多态性与生产性能相关研究李庚航指导教师麴捡瘩副熬埕学科专业盐掳皿蠖直控与墨堕研究万同盐王数量遵蠖与煎直弛2005年6月摘要本试验选用9对微卫星标记引物。通过其在长毛兔基因组上的PCR扩增，利用扩增产物分析了这些微卫星标记的多念性及其与体重、产毛量的相关性。结果表明所选9对微卫星引物中，有7对扩增出产物并呈现出多念性，且所有扩增结果都能重复。微卫星标记座位平均检测到4．14个等位基因；位点DIMIT30的等位基因数有4个，位点D7MIT62有3个，位点D7MIT82有3个，位点D9MIT46有4个，位点SOL44有6个，位点SATL2有4个，位点S0130有5个，6个微卫星标记的平均多态信息含量为0．609，平均杂合度为0．691。通过最4,乘分析标记与生产性能的相关，结果显示，标汜DIMIT30基因型DD对应的129同龄产毛量显著高于基因型BDPO．05，极显著高于基因型从、AB、AD、BB、BC、CC和CDPO．01。标记DIMIT30基因型从对应的202日龄产毛量显著高于基因型AD和BDPO．05，极显著高于基因型BBPO．01。标记DIMIT30基因型AB对应的202同龄体重显著高于基因型BC、CD和DDPO．05，极显著高于基因型ADPO．01，而基因型阴对应的202同龄体重极显著低于其它所有基因型PO．01。标记SATL2基因型BC对应的129同龄体重显著高于基因型AB和CCPO．05，极显著高于基因型C和CDPO．01。说明了微卫星标记DIMIT30和标记SATL2可作为长毛兔体重、产毛量性状连锁分析的候选遗传标记．为进一步的长毛兔体重性状、产毛量性状的QTL定位以及分子标记辅助选择等研究提供理论依据。通过相关分析发现，129同龄产毛量与129R龄体重间存在极显著正相关，129R龄产毛量与202日龄体重问存在极显著正相关，129日龄体重和202日龄体重『自J存在极显著正相关。202R龄产毛量与202闩龄体重闻存在极显著正相关。关键词长毛兔生产性能体重产毛量微卫星标记多态性相关分析

简介：扬州大学博士学位论文鸡肉IMP含量相关候选基因SNP筛查及其用于地方鸡种群体遗传结构分析的研究姓名季从亮申请学位级别博士专业动物遗传育种与繁殖指导教师陈国宏张学余20050501PCRSSCP结合序列测定的方法，在泰和乌骨鸡、萧山鸡、白耳鸡、藏鸡及隐性白羽肉鸡群体中对该基因的所有外显子与内含子的部分区域进行SNP扫描T共检测出多态位点5个，分别为外显子2中的3484处C／T，内含子5中7426处的T／C，内含子6中7942处的G／C，外显子9中9839处的C／A以及内含子LL中12546处的T／C。5个8NP位点分别命名为ADSLL、ADSL2、ADSL3、ADSL4、ADSL52ADSL4位点的CA突变为错义突变，导致对应的氨基酸序列的第273位氨基酸发生变异脯氨酸PRO一苏氨酸THRT尽管该位点的基因型分布在不同鸡种问存在显著差异，但进一步的方差分析结果表明，该位点与胸肌肌苷酸含量之问并不存在关联；3其它4个SNP位点在5个鸡种中的基因型分布也存在显著差异，但仅ADSLL位点显示出与胸肌肌苷酸含量之问存在着显著相关，其TT型突变型个体的肌苷酸含量极显著地高于另外CT型与CC型个体PO01，初步认为该位点可以作为肌肉IMP含量的辅助选择标记。3以鸡IMP合成代谢过程中的甘氨酰胺核苷酸合成酶GARS5氨基咪唑核苷酸合成酶AIRS一甘氨酰胺核苷酸转甲基酶GART基因为候选基因，采用PCRSSCP结合序列测定的方法在泰和乌骨鸡、萧山鸡、白耳鸡、藏鸡等4个地方鸡种以及1个外来鸡种一隐性白羽肉鸡对该基因的5’侧翼序列的263BP的片段、所包含的21个外显予以及外显子／内含子的结合区域进行SNP扫描1共检测出多态位点10个，分别为5’侧翼序列中的一179处的C／T，外显子3中的5669处的A／G，外显子4中6545处的C／A，内含子4中7777处的A／G，内含子6中10854处的G／T、10867处的C／T、10898处的G／A，内含子1L中16197处的A／G，内含子14中21228处的C／T，外显子21中29686处的C／T。其中外显子4中的6545处的CA突变导致对应的氨基酸序列中的第173位氨基酸发生变异天冬氨酸ASP一谷氨酸GLULO个SNP位点依次命名为GARL、GAR82、GARS3、GARS4、GARS5、GARS6、GARS7、GARS8、GARS9、GARE10；210个SNP位点在不同的鸡种中的基因型分布差异显著P005，进一步的方差分析显示，GASRL位点以及GARS3位点与肌肉肌苷酸含量之II白J存在着显著的关联；3在所检测的5个群体中GARSL位

简介：南昌大学硕士学位论文重组多杀性巴氏杆菌细菌幽灵的研究姓名刘东胜申请学位级别硕士专业生物化学与分子生物学指导教师朱必凤杨旭夫20081225摘要率高达100％。本研究对于改变传统疫苗灭活方法、实现遗传灭活新思路和研究新型疫苗以及开辟动物疫苗新途径具有重要的理论和应用意义。关键词噬菌体裂解基因E；多杀性巴氏杆菌；细菌幽灵；载体构建II

简介：重庆大学硕士学位论文影响荷斯坦母牛产奶性状候选基因的研究姓名何玺申请学位级别硕士专业生物学指导教师王凭青201004重庆大学硕士学位论文中文摘要IICC、CT、TT，基因型频率分别为0751、0234、0015。Χ2检验表明该两个多态位点均处于HARDYWEINBERG平衡。关联分析表明，AG和GG基因型蛋白率最小二乘均值显著高于AA基因型所对应的值（P005）；GG是提高蛋白率的最有利基因型，AA是最不利基因型。TT和CT基因型305D产奶量最小二乘均值显著高于CC基因型所对应的值（P005）；TT是提高305D产奶量的最有利基因型，CC是最不利基因型；CC和CT基因型乳脂率最小二乘均值显著高于TT基因型所对应的值（P005）；CC是提高乳脂率的最有利基因型，TT是最不利基因型。关键词关键词荷斯坦母牛，PPARGC1A基因，FASN基因，STAT5A基因，多态性，产奶性状

简介：本试验首先以同龄、同场的60头国内、外肉牛品种为研究对象，利用超声波活体检测技术采用最小二乘法建立了肉牛宰后肉质性状的预测模型，显示超声波技术不仅可以准确、快速、低成本的检测肉牛背膘厚、眼肌面积和大理石花纹情况，还提供了通过检测活体性状预测宰后性状的可能。为研究肉牛生长发育和脂肪沉积的分子机制，本试验以西门塔尔牛公牛和阉牛各3头作为试验材料，因为阉割是肉牛生产中常用的技术手段，阉割后肉牛在习性、外观和生长发育过程都发生了很大的改变，这些发展的速度很慢，暗示这些发展是通过基因表达差异的改变进行的，因此采用AFFYMETIX公司的基因芯片技术，研究了二者之间肝脏和脂肪组织的基因表达谱，经过数据分析找到了因阉割引起的生长发育减缓，脂肪沉积速度加快的有关的差异表达基因。并通过荧光定量PCR技术对芯片结果进行验证。结果如下1本研究在国内首次建立了超声波技术活体检测技术预测牛肉产量的数学模型屠宰EMA306032103838月龄EMA，屠宰EMA835200887320月龄EMA；屠宰RIB1203777034708月龄RIB12，屠宰RIB12028560420320月龄RIB12；高档肉质量036168月龄EMA4048248月龄RIB1200658月龄体重，高档肉质量067658月龄EMA3909748月龄RIB12，高档肉质量0445120月龄EMA1384720月龄RIB120017720月龄体重，高档肉质量0562120月龄EMA2720820月龄RIB12；后部肉质量113168月龄EMA2446788月龄RIB12009858月龄体重，后部肉质量160348月龄EMA2239248月龄RIB12，后部肉质量0986920月龄EMA9503620月龄RLB120014820月龄体重，后部肉质量1084920月龄EMA8384320月龄RIB12；优质肉质量149328月龄EMA6495028月龄RIB12016428月龄体重，优质肉质量283848月龄EMA6148988月龄RIB12，优质肉质量1432020月龄EMA8119020月龄RIB120032520月龄体重，优质肉质量1647020月龄EMA5663620月龄RIB12；胴体质量833978月龄EMA20416188月龄RIB12032708月龄体重，胴体质量988568月龄EMA19882858月龄RIB12，胴体质量0954720月龄EMA93469920月龄RIB120575320月龄体重，胴体质量4499420月龄EMA7687020月龄RIB12。模型都达到显著水平P＜005，可以在实际生产中灵活运用。通过我们实践中测得的牛数据对模型的验证，表明所得模型计算方便，精确度高，具有较强的实用性，提供了从幼龄牛或成年牛预测宰后性状的可能。2对西门塔尔牛公牛和阉牛各5头的生长性状和肉质性状进行分析，发现育肥初公牛和阉牛的生长发育性状体重、体高、体斜长、胸围和管围无差异P＞005，肥育14个月后公牛体斜长、出栏重、屠宰重、胴体深显著高于阉牛P＜005；肉质性状中公牛胴体重、蹄重、前腿肉、脂色、眼肌面积显著高于阉牛，但系膜网膜油、大理石花纹、背膘厚、水分和含钙量显著低于阉牛P＜005，且公牛脖肉、里脊和上脑重极显著高于阉牛P＜001，结果可以看出，与生长相关的性状阉牛发育较慢，但脂肪沉积速度较公牛快，阉牛肉质性状较公牛好。3随机选取健康无病公牛和阉牛各3头，利用AFFYMETRIX基因芯片对其肝脏组织进行差异表达分析发现，公牛与阉牛相比代表334个基因的362个探针发生转录变化大于等于2倍或小于等于05倍，其有251个已知基因发生转录改变，上调195条、下调56条，它们主要20个参与免疫系统过程、26个参与刺激应答、22个参与发育过程、19个参与多细胞有机过程、9个参与生物粘连生物学过程，多位于胞外区13个，具有结合功能77个。没有分类信息的基因132个。结合关键字方法共获得直接影响生长发育和脂质代谢的基因173个在肝脏中发生转录变化。涉及酶调控功能、结合功能、催化功能、抗氧化剂功能、分子转运功能、结构分子功能、转录因子功能和运输功能。通路分析结果显示阉割后引起生长发育迟缓的机理可能是阉割后雄激素分泌的减少会引起肝脏IGF1，上调和IGFBP5转录下调，从而引起胰岛素通路上FBP2和PPARGC1A、肌动蛋白调控通路上ACTG2、BAIAP2、MGC127421、ITGB2和SCIN基因发生转录变化，从而导致肌肉合成速度减慢。并且阉割后引起大量免疫相关基因BOLADQA1、BOLADQA2、BOLADRB13、SELL、JSP1、EVA1、LRRC25、CD53、LOC783725、FCGR3A发生转录变化，揭示阉割后可能免疫基因的转录变化也影响了生长发育和脂质代谢。4对阉牛和公牛脂肪基因芯片筛选发现，有1925个已知基因发生转录改变，上调103条、下调1822条，它们主要参与代谢过程406个、生物调节176个、定位138个、巨大细胞过程95个、刺激应答91个、发育过程89个、生长16个、免疫过程41个和生物粘连38个，多位于细胞器官301个、胞外区64个和外膜36个上，多数为涉及结合功能524个、催化功能326个和酶调控功能57个的基因。经分析推测由于阉割，引起雄性激素和雌性激素代谢途径中的HAD11B1、UGT1A1和HSD基因差异表达，引起激素水平中的LHCGR、PRL、PRLR和GHR转录下调，从而调节APOE，影响脂类代谢。阉割可能引起脂肪细胞自身分泌LEP基因减少，并且乳糖通路所有基因在转录水平上均发生变化。引起免疫通路中IL23和EPO发生变化，从而引起一系列反应，影响蛋白质水解过程。从而影响脂肪沉积过程。5肝脏和脂肪差异表达基因结果各选择了10个代表性基因进行FQPCR验证，结果显示除脂肪LEPR基因外所有的基因表达变化趋势与芯片杂交反映的结果一致，基因的表达变化情况符合生理学特征，也从另外一个角度证明本研究筛选的生长发育和脂肪沉积相关基因准确可靠、具有潜在的应用价值。LEPR基因检测结果不符合也证明了选择05，2作为筛选标准具有实践性，采用倍数法不应任意缩小差异标准。总之，本研究获得的差异表达基因为今后进一步深入研究牛乃至整个哺乳动物生长发育和脂肪沉积提供了一个有价值而重要的候选基因库。

简介：河北师范大学硕士学位论文长角血蜱卵黄蛋白单克隆抗体的制备和卵黄发生的研究姓名李晓明申请学位级别硕士专业动物学指导教师刘敬泽闫静辉20090406硕IJ学位论文K角J札蜱卵赞筮J单克降抗体的制薪和卵施发生的研究7、长角血蜱VG只有一种，是一种糖脂复合蛋白，相对分子质量为487KD，由7个亚基组成，亚基相对分子质量分别为165KD、134KD、112KD、80KD、78KD、71KD和65KD。8、长角血蜱VG经双向电泳分析表明，VG内可溶性蛋白约由16个蛋白点组成，P4和P6为单一的蛋白点，等电点集中在58之『自J。9、应用GC／MS技术鉴定VG脂类，结果表明，VG脂类的主要脂肪酸成分为十六烷酸和十八烷酸。关键词长角血蜱，卵黄发生，卵黄蛋白，单克隆抗体，脂肪体，血淋巴，卵巢，卵黄原蛋白IV

简介：小反刍兽疫PESTEDESPETITSRUMINANTS，PPR是由小反刍兽疫病毒PESTEDESPETITSRUMINANTSVIRUS，PPRV引起的一种山羊、绵羊等小反刍动物的急性、接触性传染病，世界动物卫生组织OIE将其定为A类动物疫病。据农业部公告，2007年7月在我国西藏日土县发生小反刍兽疫疫情，这是我国首次报道该病。因此，在我国开展小反刍兽疫的病原学、流行病学和诊断研究具有重要意义。本研究将小反刍兽疫病毒NIGERIA751株在VERO细胞中传代培养，然后提取病毒RNA，用RTPCR方法扩增F基因并克隆至PMD18T载体中，获得重组质粒PMD18F，测定F基因序列并对其编码的蛋白进行结构预测和分析以PMD18F质粒为模板，根据结构预测结果，克隆除去N端信号肽和跨膜区的F基因片段，将其亚克隆至原核表达载体PET30A中，得到重组表达质粒PET30F1，转化大肠杆菌BL21DE3，用IPTG诱导表达，并通过SDSPAGE、WESTERNBLOT分析表达产物，同时用重组F蛋白免疫家兔制备多克隆抗体，ELISA测定抗体效价并用间接免疫荧光检测该多抗与PPRVNIGERIA751株全病毒的反应性。结果显示，目的基因正确插入了表达载体，在大肠杆菌中主要以包涵体形式表达，重组蛋白免疫家兔3次后，血清抗体达到较高水平。WESTERNBLOT分析表明，表达产物能与兔血清抗体发生特异性反应，间接免疫荧光试验显示，重组蛋白免疫兔阳性血清能够识别PPRVNIGERIA751株全病毒抗原，说明重组蛋白具有较好的反应原性将重组F蛋白纯化后免疫3月龄山羊，每隔一周用间接ELISA测定抗体效价，结果显示，重组F蛋白能够诱导山羊产生特异性的体液免疫应答。以纯化的重组F蛋白免疫BALBC小鼠，运用杂交瘤细胞技术，将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP20进行融合。经过多次克隆化和间接ELISA筛选，获得了五株能分泌抗F蛋白抗体的杂交瘤细胞株，用鼠单克隆抗体分型试剂盒鉴定，其中3株为IGG2A亚类，1株为IGG2B亚类，1株为IGA亚类，经WESTERNBLOT分析表明，杂交瘤细胞分泌的抗F蛋白能够与重组融合蛋白发生特异性反应，生物学特性鉴定显示，获得的杂交瘤细胞分泌抗体具有较好的稳定性，这为进一步建立基于该单抗的小反刍兽疫检测方法提供了依据，

简介：福建农林大学硕士学位论文鹌鹑蛋清溶菌酶的分离纯化及其性质研究姓名赵宁申请学位级别硕士专业临床兽医学指导教师黄志坚20090401福建农林大学硕士学位论文STUDYONISOLATION，PURIFICATIONANDPROPERTIESOFLYSOZYMEOFQUAILEGGWHITEABSTRACTINORDERTOLEARNMOREABOUTTHEPROPERTIESOFEGGWHITELYSOZYME，CMSEPHAROSEFFCATIONEXCHANGECOLUMNCHROMATOGRAPHYANDS印HADEXG一75GELCHROMATOGRAPHYWEREUSEDTOPURIFYQUAILEGGWHITELYSOZYMETHERESULTSSHOWEDTHATTHEREWEREVERYCLEARDISTINCTIONAMONGTHEPEAKS，ANDTHEDESIREDEFFECTOFPURIFICATIONWASACHIEVEDINTHEPROCESSOFPURIFICATION，CATIONEXCHANGECOLUMNCHROMATOGRAPHYHADTHEMOSTOBVIOUSEFFECTITIMPROVED259TIMESOFTHEPURITYANDREMOVEDTHEMAJORITYOFHYBRIDPROTEINFINALLYLYSOZYMEACTIVITYREACHED148215U／MG，THEPURITYOFTHEPROTEINWASIMPROVED290TIMES，ANDTHEACTIVITYRECOVERYWAS38％THEPAGE，SDSPAGE，TEMPERATURE，PHANDMETALIONSWEREUSEDTOSTUDYANDIDENTIFYCHARACTERISTICSOFQUAILEGGWHITELYSOZYMEEACHELECTROPHORESISSHOWEDASINGLEBAND，INDICATEDTHATTHEPURITYOFLYSOZYMEREACHEDELECTROPHORESISCLASS，ITSMOLECULARWEIGHTISABOUT16000DATHISLYSOZYMEHADLOWERACTIVITYAT10“C“20“CAND40“C“60“C，WHILETHEACTIVITYREACHEDMAXIMUMAT30℃THISSHOWEDTHAT30“CWASTHEOPTIMUMTEMPERATUREFORTHELYSOZYMEATNEUTRALENVIRONMENTPH6～7，THEACTIVITYOFLYSOZYMEHADSTRONGESTACTIVITYATACIDICPH75ENVIRONMENT，THEACTIVITYOFTHETYSOZYMEREDUCEDZN2CU2COULDACTIVATETHELYSOZYME，BUTMN2A矿INHIBITEDTHEACTIVITYOFTHELYSOZYMEANDBA2CAZFE3N矿HAD110SIGNIFICANTIMPACTONTHEACTIVITYTHEANTIBACTERIALACTIVITIESOFLYSOZYMEWASRESEARCHEDINVITRO，INCLUDINGINHIBITIONSPECTRUM，MINIMALINHIBITORYCONCENTRATIONANDINHIBITIONMECHANISMWHICHWASSTUDIEDBYTRANSMISSIONELECTRONMICROSCOPYTEMTHERESULTSSHOWEDTHATTHELYSOZYMECOULDRESISTTHEINFECTIONOFGRAMPOSITIVEBACTERIASUCHASSTAPHYLOCOCCUSAUREU，BACILLUSSUBTILISANDITMAYRESISTAPARTOFGRAMNEGATIVEBACTERIASUCHASAEROMONASHYDROPHILABACTERIA，VIBRIOANGUILLARUMBUTECOLI，YERSINIABACTERIOSTASISCOULDNOTBEINHIBITEDTHEMINIMALINHIBITORYCONCENTRATIONS2

简介：厦门大学硕士学位论文鸡血管内皮锌指转录因子（VEZF1）在血管内皮细胞分化与血管生成中的作用研究姓名葛君申请学位级别硕士专业细胞生物学指导教师袁立20090611ABSTRAETABSTRACTTHEVASCULARSYSTEMSTARTSWITHTHEENDOTHELIALPRECURSORCELLSHEMANGIOBLASTS／ANGIOBLASTSDIFFERENTIATIONFROMTHEFORMINGMESODERMSUBSEQUENTLYTHESEPRECURSORCELLSMIGRATETOTHEDESTINATEDPOSITION，PROLIFERATE，DIFFERENTIATE，ANDCOALESCETOFORMAPRIMITIVEVASCULARNETWORKTHISPROCESSISTERMEDVASCULOGENESISTHEPRIMITIVEVASCULARNETWORKISTHENREMODELEDINTOTHEHYRACHICALMATUREVASCULATURETHROUGHAPROCESSTERMEDANGIOGENESISMOREOVERDURINGTHISTIMETHEVASCULARFLEEALSOBECOMESSUCCESSIVELYINVESTEDBYTHEMESENCHYMALCELLS，WHICHGIVERISETOPERICYTES，SMCSSMOOTHMUSCLECELL，ANDFIBROCYTESTHEINTERACTIONSBETWEENENDOTHELIALCELLSANDTHEIRSUPPORTINGCELLSASWELLASTHESURROUNDINGMATRIXOFDIFFERENTSOURCESRESULTINTHEFUNCTIONALVASCULATURESEENINVARIOUSORGANSANDTISSUESINTHESEPROCESSESENDOTHELIALCELLSAREKEYCELLSINORDERTOSTUDYTHEMECHANISMOFVASCULARENDOTHELIALCELLDIFFERENTIATION，WECLONEDSOMEVASCULARENDOTHELIALPRECURSORCELLSSPECIFICEXPRESSIONGENESFROMTHETHREESOMITESCHICKEMBRYOSICHOSEMOUSEVEZFLVASCULARENDOTHELIALZINCFNGERTRANSCRIPTIONFACTORIHOMOLOGASTHEAIMOFOURRESEARCHTHISNEWLYDISCOVEREDGENEHASBEENREPORTEDTOSPECIFICEXPRESSIONINTHEVASCULARENDOTHELIALCELLSANDTHEIRPRECURSORSDURINGEARLYMOUSEDEVELOPMENTWEEXPECTTHESTUDYOFVEZFLFUNCTIONWILLOFFERSOMEPOSITIVEINFORMATIONFORUNVEILINGTHECELLULARANDMOLECULARMECHANISMOFENDOTHELIUMDIFFERENTIATIONANDVESSELFORMATIONRNAITECHNOLOGYWASFIRSTAPPLIEDINFUNCTIONALANALYSISONCHICKENEMBRYO，THROUGHISOLATIONOFCHICKENANGIOBLATSCELLSWITHIMMUNOMAGNETICBEADS，WERESEARCHEDONTHEINFLUENCEOFVEZFLONTHESECEILSTARGETINGTOTHEVEZFLMRNASEQUENCE，ALLRNAICONSTRUCTPPRIMECMVGFPCVEZF1MICRORNAWASBUILTANDPACKEDINTOVIRUSWITHATHREEPLASMIDSSYSTEMIN293TWEINFECTEDCHICKENDOTHELIALCELLS／NVITROANDEARLYCHICKEMBRYOS／NVIVOTHERESULTSAREASFOLLOWS1WESUCCESSFULLYCONSTRUCTEDRNAILENTIVIRUSVECTORPPRIMECMVOGFPCVEZF1MICRORNATHEVEZFLGENESILENCINGEFFICIENCYISABOUT75％INCHICKENFIBROBLASTCELLS，Ⅱ

简介：扬州大学硕士学位论文犬猫结核病分子检测技术的建立及防治方法的初步探索姓名王伟申请学位级别硕士专业预防兽医学指导教师丁铲秦爱建20090501II扬州大学硕士学位论文从上海市不同区县采集352份犬猫鼻液、痰液、尿液及宠物饲料样品进行检测，以16SRRNA、IS6110、RV3878、ISL081、ESAT6和CFP10等为目的基因设计引物，结果显示非健康犬猫样品DNA中，ESAT6和CFP10基因检出率分别为43％和386％，对应的16SRI斟A基因符合率仅为7％～8％，而致病性分枝杆菌特异的引物TB274、IS6110和ISL081基因不能被检出；而在健康犬猫样品DNA中，所有基因的检出率均很低。本研究结果表明，健康犬猫可能携带有大量非典型分枝杆菌，而且罹病犬猫被非典型分枝杆菌感染的几率较健康犬猫更大。3CFP10／ESA工6融合蛋白诱导IFN吖产生的初步研究以牛分枝杆菌强毒株DNA为模板，扩增获得CFP10和ESAB6基因，利用疏水性氨基酸GLY4SER3为LINKER，将两个蛋白融合表达于PET32A载体中，并再ESAT6的C端连接HIVTAT的蛋白转导域，得到的两种融合蛋白表达载体分别命名为PCEL06、PCET。将上述载体转化BL21DE3菌，经IPTG诱导，获得CET和CEL06可溶性融合蛋白，将其分别免疫小鼠制备多抗，经重组杆状病毒检测为免疫荧光阳性反应。将上述抗原免疫KM系小鼠，4免后，取脾脏，分离淋巴细胞，利用CFP10118龃、ESAB6116姐多肽为刺激物，采用ELISPOT法检测IFN吖分泌水平。结果显示上述融合蛋白并可诱导低剂量的IFN吖产生，但差异并不显著。4结核杆菌泛酸激酶的原核表达及纯化泛酸激酶COAA是泛酸COA合成的关键性调节酶，可以用拟胆碱药物通过竞争性抑制泛酸激酶的活性从而达到抑菌目的。本试验克隆表达了牛分枝杆菌和鸟分枝杆菌的泛酸激酶基因CO以，将其连接到PET32A载体中进行原核表达。结果显示鸟分枝杆菌泛酸激酶呈现可溶性表达，而牛型分枝杆菌却呈包涵体形式。随后，通过HIS纯化试剂盒纯化获得鸟分枝杆菌泛酸激酶的原核表达产物。该一研究为进行泛酸激酶酶活性测定、突变酶活性位点、开发抗结核药物等研究工作奠定了一定的基础。关键词犬猫结核病荧光定量PCR；分子流行病学调查；ESAT6；CFP10；泛酸激酶

简介：⋯I㈩LIIII⋯⋯LY1532404”女9一舅中钎髭久等硕士学位论文垒叠整垒釜鱼睦叁旦鱼查隆丛苤叁姿金堑学位申请人姓名申请学位学生类别申请学位专业方向指导教师姓名女§一一型堡塞垒制塑±型些望型壁垒型±邀⑨硕士学位论文MASTER‘STHESIS综上所述，本文克隆了家蚕整合蛋白两个P亚基并分析了注射凝胶珠对其表达量的影响。研究结果丰富了鳞翅目昆虫整合蛋白P亚基的研究并为将来深入研究整合蛋白与昆虫细胞免疫问的关系打下了基础。关键词整合蛋白P亚基；家蚕；包囊作用血细胞；细胞免疫

简介：扬州大学硕士学位论文狼山鸡微卫星标记的种质资源评估及开发利用姓名许世勇申请学位级别硕士专业农业推广养殖指导教师王志跃罗融20091201扬州人学专业学位论文产业开发的目标，充分发挥地方政府的推动和引导作用；加强与高校及科研院所的科研合作，深入开展科学研究；整合现有狼山鸡资源，利用狼山鸡现有三个保种基地的资源，努力培育狼山鸡新品系；大力推进龙头企业发展；拓宽销售产品种类和市场；加强产品开发，突破现有禽产品加工状况；积极探索新的管理模式，发展农村专业合作经济组织；强化生产管理，实施标准化生产，提高产品质量，切实做到狼山鸡产业更好、更快地发展。关键词狼山鸡；资源；微卫星；品种选育；开发利用；产业

简介：辽宁师范大学硕士学位论文辽宁新品系绒山羊2129号染色体经济性状的QTL定位研究姓名何振瑞申请学位级别硕士专业细胞生物学指导教师金梅20090501ABSTRACTCASHRNEREISTHEBESTTEXTILEMATERIALINTODAY’SWORLDITISCALLED‘JEWELFIBER”AND“SOFTGOLD’OWINGTOPOSSESSTHIN，LIGHT，WARM，SLIPPERYCOMFORTABLE，BEAUTIFULANDELEGANTSOCASHMEREGOATISANECONOMICANIMALFORITSUNIQUECASHMEREPRODUCTSTHELIAONINGNEWBREEDOFCASHMEREGOATS，ASPECIALGENETICSOURCE，AREFORBIDDENTOSPILLOVERANDFAMOUSFORTHEIRHIGHCASHMEREYIELDANDGOODCASHMEREFINENESSAREFERENCINGFLOCKHAVING5PATERNALHALFSIBFAMILIESTOTALING220INDIVIDUALSFROMLIAONINGNEWBREEDOFCASHMEREGOATSWASUTFLISEDTOANALYZETHEALLELEFREQUENCYHETEROZYGOSITYANDPOLYMORPHISMINFORMATIONCONTENTPICOF30MICROSATELLITEFROM21“TO29恤CHROMOSOMESOFCASHMEREGOATGENOMECONSTRUCTEDTHEGENETICLINKAGEMAPSFROM21“TO29也CHROMOSOMESANDSTUDIEDTHEQTLMAPPINGAFFECTINGWEIGHT，CASHMEREYIELDANDFINENESSTRAITSUSINGQTLEXPRESSTHEAVERAGENUMBEROFALLELES，PIEANDHETEROZYGOSITYOFMICROSATELLITESWERE85FROM2TO15，0699303182PIC07952AND09488O5462H10000RESPECTIVELYANDALLMARKERSWEREHIGHPOLYMORPHICEXCEPTLSCV46WASMIDDLEPOLYMORPHICWHICHCOULDSUBSTANTIALLYGUARANTEETHERELIABILITYOFTHERESULTOFTHERESEARCHGENETICLINKAGEMAPSOFLIAONINGNEWBREEDOFCASHMEREGOATFROM21吼TO29ⅡCHROMOSOMESWEREBUILTBYCRIMPA24SOFTWARETHELOCUSORDERWASTHESAMEASTHEINTERNATIONALGOATCHROMOSOMEGENETICMAPS，BUTSLIGHTLYSHORTERINLENGTHBASEDONTHEUSEOF21吼TO29也CHROMOSOMESGENETICMAPSOFLIAONINGFLEWBREEDOFCASHMEREGOAT，THEQTLMAPPINGANALYSISOFCASHMEREGOATWEIGHT，CASHMEREYIELDANDFINENESSWASPERFORMEDBYUSINGREGRESSIONITSHOWEDTHATIN33MFAMILYONTHE22阻CHROMOSOME，THEREWEREAQTLLOCUSEFFECTINGFINENESSON4CMBETWEENLSCVL4ANDHRHLANDAQTLLOCUSEFFECTINGWEIGHTON8CMBETWEENHRHLANDBML558ONTHE27“CHROMOSOME，THEREWASAQTLLOCUSEFFECTINGFINENESSON36CMBETWEENCSSM43ANDOARJMP58；ONTHE29MCHROMOSOME，THEREWASAQTLLOCUSEFFECTINGWEIGHTINTHEIDVGA07LOCUSALTHOUGHONOTHERCHROMOSOMESDETECTEDQTLLOCUS，NONEHADSIGNIFICANTEFFECTKEYWORDSLIAONINGNEWBREEDOFCASHMEREQTLGOAT，MICROSATELLITEMARKERGENETICLINKAGEMAP，Ⅱ

简介：扬州大学硕士学位论文奶牛FCGRT基因启动子多态性及激素对FCRN表达影响的研究姓名张春林申请学位级别硕士专业动物营养与饲料科学指导教师王加启赵国琦20100501著高于单倍型CAPGL3BASIC和CAPGL3BASIC的相对荧光值，单倍型CAPGL3BASIC相对荧光值又显著高于单倍型TAPGL3BASICP005。FCGRT启动子不同单倍型载体表达存在差异，SNP影响了FCGR赡动子的转录活性。奶牛FCGR瑾因启动子不同单倍型的真核表达载体成功构建，为FCGRT基因启动子功能研究和转录调控奠定了基础。试验三采集健康中国荷斯坦奶牛乳腺组织，通过测序检测砌孺动子单核苷酸多态性，分析各单倍型对表达水平影响，研究中国荷斯坦奶牛FCGRT启动子SNP对FERNMRNA表达水平的影响。结果表明，不同单倍型中国荷斯坦奶牛乳腺内FCRNMRNA表达水平明显不同。FCGRT启动子单倍型CC奶牛乳腺中FERN表达最高，显著高于单倍型TA和CAP005。单倍型CA乳腺组织FERN表达量显著高于单倍型TAPD05。FCGRTF自动子SNP对FERN的MRNA的表达有一定的影响，可能会进一步的影响乳腺中FCRN的表达以及对IGG的转运。试验四以中国荷斯坦奶牛乳腺上皮细胞为研究工具，采用了RTPCR方法检测激素处理对FERNMRNA表达的影响。本文测定了体外培养乳腺上皮细胞时，添加不同浓度甲状腺素T40、O01、01、LILXNOL／L、胰岛素0、0005、01、051TMOL／L、胰高血糖素0、O01、O1、1ITMOL／L对FERNMRNA的表达的影响。试验结果表明随着激素添加剂量的增加，甲状腺素和胰高血糖素能够显著的促进表达量升高职005，而胰岛素添加后FERN基因M_RNA的表达先升高后降低俨DD∞。因此，添加外源胰岛素、胰高血糖素和甲状腺素能够影响FERN基因MRNA的表达，为进一步研究乳腺内FCRN受体变化以及影响因素提供了依据。关键词中国荷斯坦奶牛；FCGRT；PCRSSCP；SNP；单倍型；激素；乳腺上皮细胞；MRNA